Чем отличается каскад от авроры: Стрижка Аврора на средние, короткие и длинные волосы: 31 фото идея

a Процент анафаз клеток, экспрессирующих миРНК RSF1, которые демонстрируют анафазные мосты или отстающие хромосомы. Эти клетки, задержанные в анафазе, окрашивали DAPI (синий) и АСА (красный). Столбцы представляют собой среднее ± SEM из трех независимых экспериментов; siCtrl n  = 252, siRSF1#1 n  = 268, siRSF1#2 n  = 172 клетки. ** p  < 0,005 по сравнению с контрольной миРНК по двустороннему непарному тесту Стьюдента t .Масштабная линейка, 5  мкм. Клетки HeLa b трансфицировали миРНК RSF1. Флотирующие митотические клетки получали после обработки нокодазолом в течение 4 ч и подвергали иммунофлюоресцентному окрашиванию указанными антителами. Ядро окрашивали DAPI (синий). Графики представляют среднее ± ± SEM из трех независимых экспериментов, показывающих относительную интенсивность сигнала Aurora B-pT232 (siCtrl n  = 42 и siRSF1 n  = 57) или Aurora B (siCtrl = 25 и siRSF1 3 n 9048=) кинетохоры.** p  < 0,005 по сравнению с контрольной миРНК по двустороннему непарному тесту Стьюдента t . Масштабная линейка, 5  мкм. c Лизаты клеток HeLa были получены из стабильно экспрессирующих контрольную или RSF1 кшРНК, а контрольные кшРНК клетки, обработанные ZM447439, ингибитором Aurora B, обрабатывали нокодазолом в течение 16 часов. Лизаты митотических клеток подвергали иммуноблотингу с указанными антителами. d Клетки HeLa , трансфицированные миРНК RSF1, обрабатывали нокодазолом в течение 16 часов.Связанную с хроматином фракцию подвергали иммуноблотингу с указанными антителами. e Митотические лизаты клеток RSF1 WT или RSF1 KO HeLa подвергали иммунопреципитации антителом против Aurora B (эндогенным) или антителом IgG мыши с последующим иммуноблоттингом с указанными антителами. Данные c – e являются репрезентативными для трех независимых экспериментов. Исходные данные предоставляются в виде файла исходных данных.

Ось RSF1-PLK1 необходима для активности киназы Aurora B

Сообщается, что PLK1 фосфорилирует INCENP и Survivin, и это опосредованное PLK1 фосфорилирование компонента CPC важно для закрепления Aurora B в CPC и его активации на центромере ^21,22 .Мы ранее сообщали, что RSF1 в митотических центромерах обеспечивает привлекательный сайт стыковки для PLK1 ³³. Соответственно, не только уровни фосфо-Aurora B, но и уровни PLK1, связанного с хроматином, были значительно снижены в клетках с истощением RSF1 (рис. 2a). Эксперименты по совместной иммунопреципитации показали, что PLK1 тесно связан с Aurora B и RSF1 в митотических клетках, но утратил большую часть связывающей способности с Aurora B в отсутствие RSF1 (рис. 2b и дополнительная рис. 1d). Эти результаты предполагают, что опосредованное RSF1 накопление PLK1 в центромерах важно для активности киназы Aurora B.Чтобы точно определить основной фактор, регулирующий активацию Aurora B, мы эктопически сверхэкспрессировали векторы экспрессии HA-Aurora B, GFP-INCENP или Myc-PLK1 в клетках с нокаутом RSF1 (KO). Мы предположили, что эктопическая сверхэкспрессия основного регулятора в клетках RSF1 KO восстановит активность киназы Aurora B. Как показано на рис. 2c, ни HA-Aurora B, ни GFP-INCENP не восстанавливали уровень фосфо-Aurora B в клетках RSF1 KO. С другой стороны, уровни фосфо-Aurora B полностью восстанавливались экзогенной экспрессией PLK1 дикого типа (Myc-PLK1 WT) или конститутивно активной формы PLK1 (Myc-PLK1 CA) (фиг.2г). Следовательно, фосфорилирование CENP-A киназой Aurora B в этих клетках было повышенным. Эффекты PLK1 были дополнительно подтверждены с помощью иммунофлуоресцентного окрашивания, которое показало, что PLK1 WT, но не мутант PLK1 (PLK1 KD) с мертвой киназой, полностью восстановил центромерную фосфо-Aurora B киназу в RSF1-истощенных клетках (рис. 2e). Примечательно, что сверхэкспрессия HA-Aurora B сама по себе не восстанавливала сниженный уровень pThr232 в клетках с дефицитом RSF1. Чтобы проверить влияние оси RSF1-PLK1 на регуляцию Aurora B, мы использовали два мутанта RSF1 (RSF1 S1359A и S1375A), которые потеряли способность связываться с PLK1 ³³ .Анализ коиммунопреципитации продемонстрировал, что мутант RSF1 S1359A или S1375A потерял связывание с PLK1 и показал значительное снижение связывания Aurora B (дополнительная рис. 2a). Кроме того, восстановление фосфомиметика RSF1 S1375D в клетках RSF1 KO повышало уровни фосфорилирования Aurora B, тогда как RSF1 S1375A уменьшало их. Соответственно, уровни фосфорилирования CENP-A оставались повышенными в клетках, экспрессирующих RSF1 S1375D (дополнительная рис. 2b). В совокупности эти находки подтверждают вывод о том, что недостаточная активность киназы Aurora B в истощенных по RSF1 клетках возникает из-за недостаточной активности киназы PLK1 на центромерах.

a Лизаты клеток HeLa были получены в результате митотической стряхивания после обработки нокодазолом в течение 16 ч в клетках, экспрессирующих миРНК RSF1. Вестерн-блоттинг фракции хроматина проводили иммуноблотингом на указанные антитела. TopoII-α использовали в качестве маркера фракции хроматина. b Лизаты контрольных клеток или митотических клеток кшРНК RSF1 подвергали иммунопреципитации антителом против PLK1 и иммуноблоттингу с указанными антителами. c Плазмида GFP-INCENP или HA-Aurora B трансфицировали в клетки RSF1 KO и обрабатывали нокодазолом в течение 16 часов. Лизаты митотических клеток подвергали иммуноблот-анализу с указанными антителами. d Экзогенно трансфицированные Myc-Plk1 WT или CA в RSF1-истощенные клетки HeLa и митотические клетки были получены с обработкой нокодазолом в течение 16 часов. Лизаты обрабатывали для иммуноблоттинга с использованием указанных антител. e Экспрессионные векторы Myc-PLK1 WT, KD или HA-Aurora B вводили в клетки HeLa, стабильно экспрессирующие кшРНК RSF1, а затем получали митотические клетки с обработкой нокодазолом.Митотические клетки окрашивали антителами против pAurora B T232 (зеленый) и ACA (красный), а для окрашивания ядер использовали DAPI (синий). На графике представлено среднее ± SEM из трех независимых экспериментов; SHCTRL N = 28, SHRSF1 = 28, SHRSF1 N = 34, SHRSF1 + PLK1 WT N = 37, SHRSF1 + PLK1 KD N = 29 и SHRSF1 + HA-Aurora B N = 24 клетки. ** p  < 0,005 против контроля кшРНК, *** p  < 0,001 против p кДНК в shRSF1 по двустороннему непарному тесту Стьюдента t .Масштабная линейка, 5  мкм. Данные a , c , d являются репрезентативными для трех независимых экспериментов. Данные b являются репрезентативными для двух независимых экспериментов. Исходные данные предоставляются в виде файла исходных данных.

PLK1 индуцирует новое активирующее фосфорилирование киназы Aurora B по остатку Thr236. его косвенной роли в фосфорилировании компонентов CPC

a Анализ киназы in vitro: рекомбинантные белки GST-Aurora B WT или KD, очищенные в бактериях, инкубировали с активным GST-PLK1 при 30 °C в течение 30 минут в присутствии γ ³² P-ATP.Включение γ ³² P в белок Aurora B визуализировали с помощью авторадиографии. Окрашивание кумасси синим демонстрирует равную белковую нагрузку. b Выравнивание последовательности Aurora B позвоночных от человека к мыши по короткой области с консервативным мотивом GT (верхняя панель). In vitro киназный анализ фосфорилированных мутантов на GST-Aurora B инкубировали с активным GST-PLK1 при 30 °C в течение 30 минут в присутствии γ ³² P-ATP. c Синхронизированные митотические клетки HeLa обрабатывали ингибитором PLK1 BI2536 или ДМСО в течение 30 мин.Затем клетки фиксировали и окрашивали антителами против pThr236-Aurora B (зеленый), Aurora B (красный) и DAPI (синий). Столбцы представляют собой среднее ± SEM из трех независимых экспериментов; ДМСО n  = 32, BI2536 n  = 35 клеток. *** p  < 0,001 по сравнению с ДМСО по двустороннему непарному критерию Стьюдента t . Масштабная линейка, 5  мкм. d Клетки HeLa , синхронизированные с митозом с помощью нокодазола, предварительно обрабатывали MG132 в течение 1 часа и BI2536, Ro3306 или ДМСО в течение 30 минут с последующим вестерн-блот-анализом с указанными антителами. e RSF WT или RSF1 KO Клетки HeLa синхронизировали с митозом с помощью нокодазола с последующим вестерн-блоттингом, проанализированным указанными антителами. Клетки HeLa f RSF WT или RSF1 KO обрабатывали нокодазолом в течение 4 часов. Митотические клетки фиксировали 4% параформальдегидом и окрашивали антителами анти-pT236-Aurora B (зеленый) и анти-Aurora B (красный). Ядро окрашивали DAPI (синий). Столбец представляет собой среднее ± SEM из трех независимых экспериментов; WT n  = 27, RSF1 KO n  = 44 клетки.** p  < 0,005 против RSF1 WT по двустороннему непарному критерию Стьюдента t . Масштабная линейка, 5  мкм. Данные a , b , d , e являются репрезентативными для трех независимых экспериментов. Исходные данные предоставляются в виде файла исходных данных.

Активация фосфорилирования Thr236 Aurora B необходима для аутофосфорилирования Thr232

Широко признано, что фосфорилирование Aurora B Thr232 в активирующей петле отвечает за его киназную активность ³⁵ .Далее мы рассмотрим, как pThr236 Aurora B связан с его фосфорилированием по Thr232. Иммуноблот-анализ лизатов клеток HeLa показал, что фосфорилирование остатков Thr236 и Thr232 было обнаружено в митотических клетках с остановкой нокодазола, но не в асинхронных клетках (рис. 4a). Затем мы создали фосфомертвый мутант Aurora B, в котором остаток Thr236 был заменен на Ala (T236A), а также фосфомиметический мутант T236D (Thr на Asp). Мы трансфицировали малую интерферирующую РНК (миРНК), нацеленную на 3′-нетранслируемые области гена Aurora B , в клетки HeLa, а затем сверхэкспрессировали HA-Aurora B WT или его мутанты.Важно отметить, что иммуноблот-анализ показал, что ни pThr236, ни pThr232 не были обнаружены в митотических клетках, трансфицированных мутантом Aurora B T236A, тогда как и Aurora B WT, и T236D индуцировали значительное фосфорилирование этих остатков Aurora B и Hec1 (рис. 4b). Аналогично, клетки, экспрессирующие либо Aurora B WT, либо Aurora B T236D, подвергали иммуноокрашиванию антителом против pT232. Напротив, клетка, экспрессирующая мутант Aurora B T236A, не была окрашена антителом против pT232 (фиг.4c), ни с антителом против pMCAK (дополнительный рисунок 3a). Эти данные убедительно указывают на то, что фосфорилирование Thr236 Aurora B с помощью PLK1 необходимо для его последующего фосфорилирования Thr232. Учитывая, что фосфорилирование Aurora B по Thr236 необходимо для активности киназы Aurora B, мы предположили, что мутант Aurora B T236A будет демонстрировать аберрантный митотический фенотип, такой как отстающие хромосомы. Мы следили за митотической прогрессией клеток HeLa после повторной экспрессии HA-Aurora B WT или HA-Aurora B T236A вместе с конструкцией GFP-h3B в клетках HeLa с истощением Aurora B.При покадровой микроскопии 90% реэкспрессирующих клеток Aurora B WT продемонстрировали правильное расхождение хромосом. Напротив, в клетках, трансфицированных HA-Aurora B T236A, часто обнаруживались дефекты выравнивания и сегрегации хромосом, приводящие к отставанию хромосом, что напоминает дефектные клетки Aurora B (рис. 4d, стрелки). Большинство этих клеток претерпели преждевременный анафазный переход, что свидетельствует о нарушении SAC (рис. 4d). Однако мы также заметили пролонгированную метафазу в части клеток (данные не показаны).Эти результаты коррелируют с частотой отстающих хромосом при иммунофлуоресцентном окрашивании. До 43% клеток, экспрессирующих HA-Aurora B T236A, имели отстающие хромосомы, тогда как мутант WT и T236D Aurora B демонстрировал гораздо более низкие уровни аберрантных хромосом (дополнительная рис. 3b). Затем мы рассмотрели, эффективна ли конститутивно активная форма Aurora B T236D в клетках RSF1 KO. Эктопическая экспрессия Aurora B T236D в клетках RSF1 KO восстанавливала уровень pT232 и увеличивала фосфорилирование MCAK, Hec1 и CENP-A (рис.4e, f и дополнительный рисунок 3c). Однако WT Aurora B в клетках RSF1 KO не восстанавливала ни уровень pT232, ни нижестоящее фосфорилирование, потому что активность PLK1 все еще дефектна в клетках RSF1 KO (рис. 2c). В совокупности данные демонстрируют, что фосфорилирование Thr236 Aurora B необходимо для активности киназы Aurora B.

a Асинхронно растущие клетки HeLa и обработанные нокодазолом клетки HeLa анализировали методом иммуноблоттинга с указанными антителами. b Иммуноблоттинг митотических клеточных лизатов в истощенных клетках Aurora B после повторного введения мутантов HA-Aurora B WT или T236A/D. c Aurora B-истощенные клетки HeLa котрансфицировали HA-Aurora B WT или мутантом T236A/D. Плавающие митотические клетки получали после обработки нокодазолом в течение 4 часов и подвергали иммунофлуоресцентным изображениям. Изображения были получены из репрезентативных митотических клеток: pT232-Aurora B (зеленый), HA (красный) и DAPI (синий). Статистический анализ интенсивности иммунофлуоресценции pThr232-Aurora B на центромерах.Столбцы представляют собой среднее ± SEM из трех независимых экспериментов; WT n  = 32, T236A n  = 46, T236D n  = 39 клеток. *** p  < 0,001 по двустороннему непарному критерию Стьюдента t . Масштабная линейка, 5  мкм. d Конструкции h3B-GFP и Aurora B (WT, T236A) котрансфицировали в эндогенные клетки, лишенные Aurora B, и синхронизировали на границе G1/S методом двойного тимидинового блока (DTB). Клетки освобождали от DTB на 8 ч и проводили анализ изображений в течение 48 ч после высвобождения DTB.Изображения получали каждые 5 мин. WT n  = 107, T236A n  = 180 клеток. Масштабная линейка, 5  мкм. Мутанты e HA-Aurora B WT или T236A/D трансфицировали в клетки RSF1 KO и анализировали с помощью иммуноблоттинга. f Плавающие митотические клетки были получены после обработки нокодазолом в течение 4 часов и подвергнуты иммунофлуоресцентному изображению: pT232-Aurora B (зеленый), HA (красный) и DAPI (синий). Данные a , b , d являются репрезентативными для трех независимых экспериментов.Данные и являются репрезентативными для двух независимых экспериментов. Исходные данные предоставляются в виде файла исходных данных.

Активация фосфорилирования Thr236 Aurora B праймирует последующее автофосфорилирование Thr232 в петле активации

Затем мы использовали структурное моделирование, чтобы получить правдоподобный ответ о том, как фосфорилирование Thr236 влияет на автокаталитическую активность киназы Aurora B в петле активации. Автофосфорилирование Thr232 в Aurora B является общей реакцией, катализируемой основаниями (дополнительная рис.3), в котором боковая цепь Asp200 служит каталитическим основанием, опосредующим нуклеофильную атаку, облегчающую перенос γ-фосфата на Thr236 ⁴⁰ . Депротонированная гидроксильная группа (-O ^– ) Thr232 эффективно осуществляет нуклеофильную атаку на γ-фосфат АТФ, генерируя pThr232. Поскольку петля активации, содержащая Thr232 и Thr236, полностью разупорядочена в кристаллической структуре Aurora B человека (код PDB: 4AF3) ³⁷ , мы использовали кристаллическую структуру Xenopus Aurora B (код PDB: 2BFX) ⁴¹ для предположить, как фосфорилирование Thr236 облегчает фосфорилирование Thr232 (рис.5а). Asp200 находится рядом с Lys202 и Thr236, где Lys202 образует благоприятное электростатическое взаимодействие с pThr236 (рис. 5b). Напротив, карбоксилат боковой цепи Asp200 будет конфликтовать с отрицательным зарядом pThr236 (рис. 5c). Это электростатическое отталкивание должно нарушать значение p K _a карбоксилата боковой цепи Asp200 для легкого протонирования, что дает преимущество в уменьшении электростатического отталкивания. Следовательно, Aurora B с pThr236 облегчает перенос протона от Thr232 к Asp200, тем самым усиливая общий катализ оснований и последующее аутофосфорилирование Thr232.Аутофосфорилирование по Thr232 Aurora B, по-видимому, является внутримолекулярным событием, поскольку уровень pThr232 Aurora B оставался низким в иммунопреципитантах меченных гемагглютинином (HA) мутантов Aurora B (D200A и T236A) даже в присутствии WT Aurora B, меченного GST (глутатион-S-трансфераза) (дополнительный рисунок 4c). Thr232 находится на расстоянии 11,6 Å от Asp200 без прямых взаимодействий (рис. 5b). Таким образом, для внутримолекулярного фосфорилирования активационная петля, содержащая Thr232, должна подвергнуться существенному конформационному изменению после фосфорилирования Thr236, чтобы поместить Thr232 в адекватное положение для активации Asp200 для атаки АТФ-γ-фосфата.Вероятность такого структурного изменения, вызванного фосфорилированием Thr236, подтверждается структурным сравнением Aurora B человека и Xenopus Aurora B. Как показано в наложенных структурах двух белков Aurora B (рис. 5a), локальные конформационные изменения петли активации, сохраняя общую структурную целостность. Между тем, у мутанта Aurora B T236A отрицательно заряженный карбоксилат Asp200, скорее всего, образует стабильную ионную пару с соседним положительно заряженным Lys202.Вращение боковой цепи Lys202 приводит ее в положение взаимодействия с карбоксилатом боковой цепи Asp200 (рис. 5d). Это стабильное электростатическое взаимодействие обязательно заставит боковую цепь Asp200 сохранять карбоксилатную форму. Соответственно, Asp200 не может эффективно активировать/депротонировать гидроксильную группу субстрата Thr232 для нуклеофильной атаки на γ-фосфат АТФ. Таким образом, наша модель предполагает, что Aurora B с фосфорилированным Thr236 облегчает фосфорилирование Thr232.Затем мы проверили функциональное значение остатков Asp200 и Lys202 в митотических клетках. Мы установили мутанты Aurora B D220A и K202A и обнаружили, что экспрессия этих мутантов в клетках Aurora B KD отменяет активацию aurora B, а также опосредованное aurora B фосфорилирование субстрата (рис. 5e, f), что убедительно свидетельствует о важности этих остатков в активации киназы Aurora B. В совокупности это первые данные, представляющие активирующее фосфорилирование Thr236 в киназы Aurora B и структурную интерпретацию его каталитического эффекта на последующее фосфорилирование Thr232.

a Наложенные друг на друга кристаллические структуры белков человека и Xenopus Aurora B, которые окрашены в белый и серый цвета соответственно. Петли активации у человека и Xenopus Aurora B отмечены красным и зеленым соответственно. Желтая стрелка указывает на разницу в положении между идентичными спиралями, выделенными кружками. b Структурное расположение Asp200, Lys202, Thr232 и Thr236 в кристаллической структуре комплекса Xenopus Aurora B-INCENP (код PDB: 2BFX).Цикл активации окрашен в зеленый цвет. Черные пунктирные линии между остатками в палочках обозначают расстояния. Атомы азота и кислорода в палочках окрашены в синий и красный цвета соответственно. c Предполагаемый способ взаимодействия между Asp200, Lys202 и pThr236. Красная стрелка представляет собой электростатическое отталкивание, а черная пунктирная линия — электростатическое взаимодействие. d Предполагаемый способ взаимодействия между Asp200, Lys202 и Ala236, когда Thr236 мутирует в аланин. Черные пунктирные линии между остатками в палочках обозначают расстояния. e Плавающие митотические клетки получали после обработки нокодазолом в течение 4 часов и подвергали иммунофлуоресцентному изображению: pT232-Aurora B (зеленый), HA (красный) и DAPI (синий). Столбцы представляют собой среднее ± SEM из трех независимых экспериментов; WT n  = 22, T236A n  = 28, D200A n  = 38, nK202A = 34 клетки. Масштабная линейка, 5  мкм. f Мутанты HA-Aurora B WT или D200A/K202A трансфицировали в Aurora B-истощенные клетки и анализировали с помощью иммуноблоттинга. Данные f являются репрезентативными для двух независимых экспериментов.Исходные данные предоставляются в виде файла исходных данных.

PLK1 отдельно проводит два ключевых события фосфорилирования на Aurora B или BubR1 в зависимости от прикрепления MT-KT

До сих пор мы продемонстрировали, что ось RSF1-PLK1 действует как сильный активатор киназы Aurora B. У высших эукариот PLK1 и Aurora B проявляют потенциально антагонистическую активность в отношении стабильности митотических веретен в ранних митозах ²³ . Чтобы исправить ошибочное присоединение MT-KT, киназа Aurora B фосфорилирует белки комплекса Ndc80, снижая аффинность связывания MT с KT ⁴² .Напротив, PLK1 увеличивает стабильность взаимодействий MT-KT за счет противодействия этому опосредованному Aurora B фосфорилированию путем привлечения фосфатазы PP2A-B56. PLK1 фосфорилирует остаток Ser676 BubR1 в KTs, который служит сайтом стыковки для PP2A-B56 ^10,18 . Таким образом, ключевой вопрос заключается в том, как RSF1 согласовывает антагонистическую активность между PLK1 и Aurora B в рамках одной и той же регуляторной оси. Мы предположили, что ось RSF1-PLK1 может управлять двумя ключевыми событиями опосредованного PLK1 фосфорилирования Aurora B (рис.1 и 2) и фосфорилирование BubR1 ³³ отдельно пространственно-временным образом в пределах центромер и КЦ. Чтобы проверить это, мы сначала использовали монастрол, ингибитор кинезина-5, для создания монополярных веретен и синтетических прикреплений, которые можно исправить с помощью активного Aurora B. Затем ингибитором протеасом MG132 на короткое время обработали клетки, освобожденные от обработки монастролом, что позволило перейти к метафазе с биориентированные насадки КТ-МТ. pThr236 (дополнительный рис. 5a) и pThr232 (дополнительный рис.5b) Aurora B, а также фосфо-MCAK (дополнительный рис. 5c) сильно проявлялись на монополярных веретенах. После высвобождения монастрола фосфорилированные Aurora B и MCAK исчезли из выровненных хромосом (дополнительная рис. 5, вставка 2), тогда как они остались на невыровненных хромосомах (дополнительная рис. 5, вставка 1). Поскольку выровненные хромосомы на метафазной пластинке уравновешиваются биориентированным прикреплением MT-KT, мы затем проанализировали клетки, задержанные в прометафазе обработкой MT-дестабилизирующим нокодазолом или MT-стабилизирующим паклитакселом (рис.6а). Как и ожидалось, наблюдалось значительное накопление pThr236 и pThr232 Aurora B в клетках, задержанных нокодазолом. Напротив, фосфорилирование было значительно ниже в клетках, задержанных паклитакселом. Поскольку натяжение было устранено в клетках, задержанных паклитакселом, даже при полном прикреплении MT-KT, различия в фосфорилировании на Aurora B будут происходить из-за степени прикрепления MT-KT, а не из-за напряжения. Такие же результаты были получены при иммуноблот-анализе клеток HeLa, задержанных в прометафазе при обработке нокодазолом или паклитакселом (рис.6b и дополнительный рис. 6a). В обеих обработках уровни PLK1 pT210 оставались фосфорилированными, но проявляли более высокие уровни в клетках, обработанных паклитакселом. pThr236 и pThr232 проявлялись только в клетках, обработанных нокодазолом. Напротив, индуцированное PLK1 фосфорилирование Ser676 BubR1 не наблюдалось в клетках, обработанных нокодазолом, тогда как оно было значительно повышено в клетках, задержанных паклитакселом (рис. 6b и дополнительная рис. 6b). Таким образом, данные свидетельствуют о том, что PLK1 предпочтительно выбирает мишень фосфорилирования Aurora B или BubR1 на основе прикрепления MT.Фактически связывание PLK1 с Aurora B и BubR1 изменялось в этих двух разных условиях. Связывание Aurora B с PLK1 оставалось стабильным в клетках, обработанных нокодазолом, но было обнаружено значительное снижение в клетках, обработанных паклитакселом (рис. 6c). В обоих случаях взаимодействие Aurora B с CPC-компонентом INCENP не изменилось. Реципрокная иммунопреципитация с антителом против PLK1 также выявила снижение связывания PLK1 с Aurora B в клетках, задержанных паклитакселом (рис. 6d). Напротив, связывание PLK1 с BubR1 не наблюдалось в клетках, задержанных нокодазолом, но показало значительное увеличение в клетках, задержанных паклитакселом.Когда проводили иммунопреципитацию с антителом против BubR1, связывание BubR1 с PLK1 и с PP2A было выше в клетках, обработанных паклитакселом, чем в клетках, обработанных нокодазолом (рис. 6e). Пространственная регуляция PLK1 на Aurora B и BubR1 также была подтверждена путем анализа конфокальной визуализации с высоким разрешением локализации PLK1 и Aurora B с помощью микроскопии сверхвысокого разрешения (SIM). Aurora B в ЦПК устойчиво располагается на внутренних центромерах, а нерастворимый BubR1 находится на наружных КЦ ^11,43,44 . В клетках, задержанных нокодазолом, PLK1 образовывал кометоподобное (гантелевидное) окрашивание, которое частично перекрывалось с Aurora B, расположенным на внутренних центромерах (рис.6е). В соответствии с приведенным выше выводом (рис. 6c, d), PLK1 в значительной степени отделялась от Aurora B в клетках, задержанных паклитакселом (рис. 6g), что свидетельствует о перераспределении PLK1 от центромер к KT. Двойное иммунное окрашивание BubR1 и PLK1 показало, что окрашивание PLK1 перекрывается с BubR1 в клетках, задержанных нокодазолом. В клетках, задержанных паклитакселом, PLK1 больше не демонстрировал кометоподобный сигнал, но полностью перекрывался с сигналом BubR1 (рис. 6g). Все эти данные убедительно подтверждают нашу гипотезу о том, что PLK1 отдельно проводит два ключевых события фосфорилирования на Aurora B или BubR1 в зависимости от прикрепления MT-KT.

a Клетки HeLa обрабатывали нокодазолом или паклитакселом в течение 4 часов. Митотические клетки фиксировали 4% параформальдегидом и окрашивали антителами анти-pT236 или анти-pT232-Aurora B (зеленый) и анти-Aurora B (красный). Ядро окрашивали DAPI (синий). Гистограмма представляет среднее ± SEM из трех независимых экспериментов; интенсивность сигнала Aurora B-pT232 (Noco n  = 26, PTX n  = 31) или pT236 (Noco n  = 23, PTX n  =  руд)= 3.** p  < 0,005 по сравнению с нокодазолом по двустороннему непарному критерию Стьюдента t . Масштабная линейка, 5  мкм. b Иммуноблоттинг фракций хроматина в клетках HeLa, обработанных нокодазолом или паклитакселом, с использованием указанных антител. c Обработанные нокодазолом или паклитакселом клетки HeLa подвергали иммунопреципитации с использованием антител против Aurora B. Исходные материалы и иммунопреципитанты анализировали вестерн-блоттингом. d Митотические экстракты клеток HeLa, обработанных нокодазолом или паклитакселом, подвергали иммунопреципитации с использованием антитела против PLK1. e Обработанные нокодазолом или паклитакселом клетки HeLa подвергали иммунопреципитации с использованием антитела против BubR1, а иммунопреципитированные образцы подвергали иммуноблотингу с использованием антител PP2A. f Конфокальные однослойные изображения PLK1 в прометафазных клетках со сверхвысоким разрешением. Обработанные нокодазолом клетки HeLa фиксировали 4% параформальдегидом и окрашивали указанными антителами. Шкала баров, 5  мкм. 90 477 г 90 475 Конфокальные изображения PLK1 со сверхвысоким разрешением в прометафазных клетках, обработанных паклитакселом. Плавающие митотические клетки окрашивали указанными антителами.Шкала баров, 5  мкм. Данные b – e являются репрезентативными для трех независимых экспериментов. Исходные данные предоставляются в виде файла исходных данных.

Движение RSF1-PLK1 к KTs регулируется Aurora B-опосредованным фосфорилированием центромерного гистона h4

Итак, следующий вопрос заключается в том, как ось RSF-PLK1 проводит селективное фосфорилирование Aurora B или BubR1 в центромерных областях. Поскольку RSF1 рекрутирует PLK1 в центромерную область ³³ , мы исследовали, демонстрирует ли RSF1 позиционные изменения, такие как PLK1, в зависимости от прикрепления MT.Под конфокальным микроскопом совместное иммунное окрашивание RSF1 и Aurora B показало различия в их относительном положении в зависимости от прикрепления МТ (рис. 7а). В клетках, задержанных нокодазолом, RSF1 выровнялся рядом с Aurora B, что похоже на совместное окрашивание PLK1 и Aurora B, хотя PLK1 больше отличается от Aurora B, чем RSF1. С другой стороны, два пятна RSF1 были разделены центромерной Aurora B в клетках, задержанных паклитакселом, что похоже на PLK1 (рис. 7a). Такой же вывод был получен в экспериментах по коиммунопреципитации (рис.7б). RSF1 связывался с гистоном h4 и Aurora B в клетках, обработанных нокодазолом, тогда как он лучше связывал BubR1 с KT в клетках, задержанных паклитакселом (рис. 7b). Т.о., результаты показывают, что как RSF1, так и PLK1 перераспределяются от центромер к KTs в зависимости от прикрепления MT. Затем мы спросили, могут ли какие-либо посттрансляционные модификации гистонов в центромерных нуклеосомах изменить взаимодействие RSF1 с центромерными нуклеосомами. Чтобы проверить это, мы проверили взаимодействие RSF1 с гистонами, используя микрочип гистоновых пептидов, который содержит посттрансляционно модифицированные гистоновые пептиды по разным аминокислотным остаткам.Интересно, что RSF1 оставался связанным с большинством гистоновых пептидов, за исключением фосфорилированного гистона h4 на Ser28 (дополнительная рис. 7a, b), который идентифицирован как мишень фосфорилирования Aurora B ⁴⁵ . Действительно, иммунофлуоресцентное окрашивание подтвердило гистон h4 pSer28 в центромерах, которые исчезали в присутствии ZM447439. (Дополнительный рис. 7c). Результат также повышает вероятность того, что опосредованное Aurora B фосфорилирование Ser28 гистона h4 является предпосылкой для повторной локализации RSF1 в KTs.Действительно, два пятна RSF1 были перекрыты BubR1 в клетках, задержанных паклитакселом, тогда как обработка ZM447439 подавляла перераспределение RSF1 в KT (рис. 7c), показывая оставшийся RSF1 на центромерах. Затем мы создали мутанты гистона h4 S28A и S28D, и анализ коиммунопреципитации показал, что мутантный миметик фосфорилирования h4 S28D значительно снижает связывание RSF1 (рис. 7d). Напротив, RSF1 связывал BubR1 лучше, когда экспрессировался h4 S28D, что указывает на повторную локализацию RSF1 в KTs.Точно так же RSF1 оставался на центромерах в клетках, экспрессирующих гистон h4 S28A, тогда как он перемещался в KTs в клетках, в которые вводили гистон h4 S28D (рис. 7e) в анализе иммунофлуоресцентного окрашивания. Вместе эти данные проясняют, что Aurora B, активированная осью RSF1-PLK1 в центромерах, фосфорилирует центромерные гистоны, что запускает повторную локализацию RSF1-PLK1 в KTs. Эта петля обратной связи между центромерами и KTs согласовывает антагонистическую активность между Aurora B и PLK1 в раннем митозе.

a Клетки HeLa обрабатывали нокодазолом или паклитакселом в течение 4 часов, а прометафазные клетки окрашивали антителами против RSF1 (зеленый) и против Aurora B (красный). Шкала баров, 5  мкм. b Обработанные нокодазолом или паклитакселом клетки HeLa подвергали иммунопреципитации с использованием антител против RSF1. Исходные материалы и иммунопреципитанты анализировали вестерн-блоттингом. c Клетки HeLa обрабатывали паклитакселом в течение 4 часов, а прометафазные клетки предварительно обрабатывали ингибитором Aurora B ZM447439 в течение 30 минут в присутствии MG132. Митотические клетки HeLa окрашивали антителами против RSF1 (зеленый) и против BubR1 (красный). Шкала баров, 5  мкм. d Клетки HeLa трансфицировали указанными конструкциями GFP-Histone h4 WT или S28A/D и обрабатывали паклитакселом в течение 16 часов. Лизаты митотических клеток подвергали иммунопреципитации с использованием антитела против RSF1. e В клетки HeLa вводили мутанты GFP-Histone h4 WT или S28A/D и обрабатывали паклитакселом в течение 4 часов. Изображения были получены из репрезентативных митотических клеток: RSF1 (зеленый), Aurora B (красный) и GFP (серый). Шкала баров, 5  мкм. f Предлагаемая модель пространственно-временной регуляции включения/выключения киназы Aurora B с помощью оси RSF1-PLK1. Новые находки отмечены оранжевыми линиями. Данные b , d являются репрезентативными для трех независимых экспериментов.Исходные данные предоставляются в виде файла исходных данных.

Получите факты о симптомах и лечении

Врачи в Авроре, Колорадо

Другие связанные аллергические каскадные статьи

• В случае чрезвычайной ситуации звоните 911
• Полиция (918) 596-9222
• Пожарная служба (918) 596-9444

* Условия использования справочника поставщиков услуг:

«Каталог провайдеров» WebMD предоставляется WebMD для использования широкой публикой в ​​качестве быстрого справочника информации о провайдерах.Каталог провайдеров не предназначен для проверки учетных данных, квалификации или способностей любого провайдера, содержащегося в нем. Включение в Справочник провайдеров не означает рекомендацию или одобрение, а отсутствие в Справочнике провайдеров не означает неодобрение WebMD.

Вам запрещается использовать, загружать, переиздавать, продавать, дублировать или «извлекать» в коммерческих или любых других целях Справочник поставщиков услуг или любые списки данных или другую информацию, содержащуюся в нем, полностью или частично, в любой среда какая-то.

Каталог провайдеров предоставляется на условиях «КАК ЕСТЬ». WebMD отказывается от всех гарантий, явных или подразумеваемых, включая, помимо прочего, подразумеваемые гарантии товарного состояния и пригодности для конкретной цели. Не ограничивая вышеизложенное, WebMD не гарантирует и не заявляет, что Каталог провайдеров или любая его часть являются точными или полными. Вы принимаете на себя полную ответственность за связь с любым поставщиком услуг, с которым вы связываетесь через Справочник поставщиков услуг.WebMD ни при каких обстоятельствах не несет ответственности перед вами или кем-либо за любое принятое вами решение или действие, основанное на информации, предоставленной в Справочнике поставщиков услуг.

Использование Каталога поставщиков WebMD любым юридическим или физическим лицом для проверки учетных данных поставщиков запрещено. База данных с информацией о поставщиках, которая ведет WebMD Provider Directory, не содержит достаточной информации для проверки учетных данных поставщика в соответствии со стандартами Объединенной комиссии по аккредитации организаций здравоохранения (JCAHO), Национального комитета по обеспечению качества (NCQA) Аккредитации проверки использования. комитета (УРАК).

Используя Каталог провайдеров WebMD, вы соглашаетесь с настоящими Условиями.

Cascade в Авроре, штат Иллинойс, в Meadow Ridge

Цены могут не включать надбавки за лоты, обновления и опции. Может взиматься плата за участие в общественной ассоциации и гольфе. Цены, рекламные акции, поощрения, функции, опции, удобства, планы этажей, высоты, дизайн, материалы и размеры могут быть изменены без предварительного уведомления. Квадратные метры и размеры являются приблизительными и могут отличаться в зависимости от фактического строительства.Описанные общественные улучшения и рекреационные объекты и удобства основаны на текущих планах развития, которые могут быть изменены и которые не обязаны быть завершены. Фактическое положение дома на участке будет определяться планом участка и планом участка. Планы этажей, интерьеры и фасады являются концепцией художника или визуализацией модели и не предназначены для демонстрации конкретных деталей. Планы этажей являются собственностью PulteGroup, Inc. и ее дочерних компаний и защищены законом США.законы об авторском праве. Для получения дополнительной информации ознакомьтесь с нашими условиями использования. Это не предложение для жителей Нью-Йорка, Нью-Джерси, Калифорнии или Коннектикута или других мест, где это запрещено законом. Этот материал не является действительным предложением в любом штате, где требуется предварительная регистрация или если она недействительна по закону. Centex Real Estate Company, LLC является лицензированным генеральным подрядчиком Северной Каролины (лицензия № 37977). Pulte Home Company, LLC является лицензированным генеральным подрядчиком в Северной Каролине (лицензия № 19311). Pulte Homes of California — лицензированный брокер по недвижимости в Калифорнии (лицензия № 02023929).Компания Del Webb’s Coventry Homes of Nevada Inc. является лицензированным брокером по недвижимости в Неваде (номер лицензии B.1002042) 7255 S Tenaya Way, Suite 200, Las Vegas, NV 89113 (702) 914-4800, идентификатор организации NMLS № 1007381-240. . American West является товарным знаком PulteGroup, Inc. и/или ее дочерних компаний. © 2020 PulteGroup, Inc. и/или ее дочерние компании. Все права защищены. [Январь 2020]

*Цифровые модели предназначены только для иллюстративных целей и могут не являться фактическим представлением конкретного предлагаемого дома, а изображают модель, имеющую функции или конструкции, которые могут быть доступны не во всех домах или могут быть доступны за дополнительную плату.Pulte Homes оставляет за собой право вносить изменения в планы этажей, материалы и/или функции без предварительного уведомления. Любые указанные размеры или квадратные метры являются приблизительными и не должны использоваться в качестве представления фактического размера дома. Изображенные планы являются собственностью PulteGroup, Inc. и ее дочерних компаний и защищены законами США об авторских правах.

ЕЕ РЕЙТИНГ ПО ШКАЛЕ ЭНЕРГИИ ДОМА ОТКАЗ ОТ ОТВЕТСТВЕННОСТИ
Эта Шкала энергопотребления дома может быть размещена на модели дома или использована в других маркетинговых материалах для домов в этом сообществе, иллюстрируя прогнозируемый рейтинг «HERS» и потенциальную экономию на коммунальных услугах.Оценки энергоэффективности могут быть выражены в виде рейтинга индекса HERS (система оценки энергопотребления дома). HERS Index® является зарегистрированным товарным знаком Residential Energy Services Network («RESNET»), некоммерческой организации 501(c)(3), созданной в 1995 году для разработки и поддержания национальных стандартов оценки энергоэффективности зданий и энергоэффективности ресурсов. Индекс HERS («Система оценки энергопотребления дома») позволяет покупателям сравнивать относительную энергоэффективность различных домов. Энергетическая оценка дома по индексу HERS определяется независимым оценщиком домашней энергии, сертифицированным RESNET («Рейтер»).Чем ниже оценка дома, тем он более энергоэффективен по сравнению с домом, указанным в HERS. Каждому снижению оценки индекса HERS на один балл соответствует снижение потребления энергии на один процент (1%) по сравнению с домом с индексом HERS, равным 100. Используя программное обеспечение энергоэффективности RESNET, оценщик определяет энергопотребление дома. оценка путем анализа планов строительства дома и проведения проверок на месте; оценка HERS, предоставленная Продавцом, как правило, не является оценкой «как построено».Обратите внимание, что в некоторых штатах были приняты новые строительные нормы и правила по энергоэффективности, поэтому недавно построенные дома в этих штатах обычно получают индекс HERS ниже 100 и, таким образом, являются более энергоэффективными, чем «стандартный» новый дом, указанный в HERS. Оценка индекса HERS для этого дома и расчетные затраты на электроэнергию, если они указаны на этикетке, являются приблизительными и основаны на средних показателях энергопотребления для определенных категорий домов, определенных HERS. Энергоэффективные функции будут варьироваться в зависимости от планов этажей, высот, дизайнерских удобств/модернизаций и местоположения дома.Продавец не заявляет и не гарантирует, что все дома, проданные Продавцом, были оценены индивидуально. Кроме того, оценка энергоэффективности может учитывать или не учитывать все опции и/или обновления, доступные для установки в доме. Продавец не гарантирует ежемесячные или годовые счета за коммунальные услуги для дома. Предполагаемые ежемесячные затраты на электроэнергию, если они указаны на этикетке, фактические затраты на энергию и/или потребление энергии зависят от ряда факторов, включая тарифы на коммунальные услуги, потребление энергии, обслуживание дома, размер домохозяйства, методы энергосбережения, ориентацию дома и окружающий климат и погодные условия.Продавец не гарантирует какой-либо конкретный уровень затрат на электроэнергию и/или газ или экономию на коммунальных услугах. Продавец не имеет деловых интересов в какой-либо организации или системе по оценке энергоэффективности дома, программном обеспечении или оценщике. Продавец оставляет за собой право модифицировать или изменять функции или компоненты при условии, что они сконструированы в соответствии с действующим законодательством. Информация, содержащаяся здесь, основана на данных, полученных от третьих лиц, и не должна использоваться в качестве единственного источника информации при принятии решений о покупке, инвестиционных решениях или налоговых решениях, а также при заключении других обязывающих соглашений.Продавец оставляет за собой право модифицировать или изменять функции или компоненты, которые сконструированы в соответствии с действующим законодательством.

10 фактов о северном сиянии, о которых вам никто не расскажет

Моя попытка увидеть северное сияние началась в сентябре 2011 года, и с тех пор мы гоняемся за ним каждую зиму. Я буквально только что уехал из гостить у Тима, когда он жил в Исландии, и уже на следующую ночь северное сияние танцевало целую неделю подряд. Они были такими яркими и такими активными, что даже не давали ему спать по ночам.После того, как Тим бредил о том, какие они невероятные, я просто должен был убедиться в этом сам.

Первый шанс у меня появился всего три месяца спустя, когда я провел пять ночей в Рованиеми, Финляндия, за Полярным кругом. И в течение пяти облачных ночей я в конце концов лег спать, наблюдая за небом до самого утра.

Затем в марте 2012 года мы с Тимом отправились на Шпицберген. На 78° северной широты и всего в 600 милях от Северного полюса мы фактически находились над Поясом Авроры.Мы провели четыре ночи в поисках неуловимой Авроры. Наконец, во вторую ночь в Тромсё (накануне моего дня рождения) наконец-то появилось северное сияние. Но было пасмурно, они были бело-серого цвета, и танцевали они меньше часа. Я видел их, но это было не то, что я ожидал, и я жаждал более зрелищного представления.

Желая встретить Новый год в Рейкьявике из-за грандиозного фейерверка, о котором мы слышали, поездка дала нам еще один повод отправиться на охоту за Авророй.

За несколько недель до нашего приключения в Исландии и с тех пор мы получили массу сообщений, комментариев и электронных писем от читателей и подписчиков о поездках, чтобы увидеть северное сияние. Мы не хотим быть Негативными Нэнси, но считаем своим долгом рассказать вам все эти пять 10 фактов о северном сиянии, о которых вам никто никогда не расскажет, чтобы у вас были реалистичные ожидания от поездки на охоту на Аврору.

1. Не гонитесь за северным сиянием; идти к месту назначения.

Из разговоров с местными жителями, в том числе с нашим новым другом Охотником за полярным сиянием, выяснилось, что никто в Исландии не видел северного сияния за 3 недели до нашей встречи. Штормы заволакивали ночное небо, и на солнце было мало активности.

Если бы мы посетили Исландию, Финляндию, Норвегию или Шпицберген только в надежде увидеть северное сияние, мы бы, наверное, сильно разочаровались. Вместо этого каждое направление давало нам фантастические возможности побыть каюрами в течение дня, отправиться в поход по леднику и поискать белых медведей в экспедиции на снегоходах.Ваше приключение станет незабываемым, если у вас запланированы мероприятия, от которых вы действительно в восторге, а увидеть северное сияние — дополнительный бонус, если они все же выйдут танцевать.

Рекомендуем

Почему Абиско — лучшее место в Европе для наблюдения за северным сиянием

Но если вы действительно хотите увидеть северное сияние в Европе, отправляйтесь в Абиско. Это самое сухое место в Швеции, и здесь самые ясные ночи почти в любом другом месте пояса Авроры.

Конечно, Северное сияние можно увидеть не только в Европе. Это также несколько мест, где вы можете увидеть северное сияние в Канаде и на Аляске, если вы хотите преследовать Аврору в Северной Америке.

2. Северное сияние непредсказуемо.

Чтобы увидеть северное сияние, нужна темная ясная ночь. Они видны с конца августа до начала апреля в любое время в темное время суток, а в таких местах, как Абиско или Тромсё, зимой они могут быть почти 24 часа в сутки.Также должны быть солнечные вспышки на солнце или солнечном ветре; Северное сияние происходит, когда солнечные частицы входят в атмосферу Земли и сильно сталкиваются с атомами газа. Есть прогнозы северного сияния, и мы даже используем приложение Aurora Forecast для iPhone, которое будет предсказывать уровень активности северного сияния.

Но дело в том, что северное сияние непредсказуемо. У нас были ясные ночи, когда прогноз Авроры показывал активность уровня 4 (высокая), и мы ничего не видели. В прогнозе Авроры говорилось об уровне 0 (отсутствие активности) в ту ночь, когда мы видели их в Миватне, Исландия.

Проверить прогноз Авроры.

3. Чтобы увидеть северное сияние, не обязательно должно быть холодно; просто должно быть темно.

Еще одно распространенное заблуждение состоит в том, что для того, чтобы увидеть северное сияние, должно быть холодно.

Северное сияние активно круглый год. Но поскольку они обычно видны только в зоне полярного сияния между 65° и 72° северной широты, они не видны с апреля по август, когда в зоне полярного сияния почти 24 часа дневного света.Люди просто склонны ассоциировать северное сияние с холодом, поскольку оно видно в зимние месяцы, но мы видели его в августе при очень комфортных температурах.

Поскольку для того, чтобы увидеть северное сияние в небе, должно быть темно, с конца августа/сентября до самого начала апреля лучше всего отправиться в пункт назначения, расположенный в зоне северного сияния, чтобы получить шанс увидеть его.

Имейте в виду, что декабрь, как правило, не лучший месяц, потому что в популярных местах наблюдения за северным сиянием, таких как Тромсё, Норвегия и Кируна, Швеция, вероятность осадков составляет около 70% каждый день в течение декабря.Осадки означают облачный покров, а облачный покров делает обнаружение северного сияния чрезвычайно трудным или часто невозможным.

Вы можете проконсультироваться на веб-сайтах о погоде, таких как WeatherSpark или The Weather Channel, чтобы узнать средние значения температуры и осадков при планировании поездки.

4. Погода в Арктике может измениться в мгновение ока.

Погода в Арктике столь же непредсказуема, как и само северное сияние.Нет ничего необычного в том, что в один и тот же день бывает солнце, облака, дождь, мокрый снег, град, снег и сильный ветер. Просто потому, что вы просыпаетесь с кристально чистым небом, это не означает, что это кристально чистое небо останется до тех пор, пока не наступит время просмотра северного сияния, когда стемнеет.

И наоборот. Шел сильный снег, и когда мы легли спать в одну из ночей, когда видели северное сияние, была 100% облачность. Что приводит нас к следующему совету…

5.Вы должны приложить усилия, чтобы увидеть северное сияние.

Как мы уже говорили, чтобы увидеть северное сияние, должно быть темно. Это может означать, что вам нужно выбраться из города, чтобы избежать светового загрязнения. Северное сияние видно в таких городах, как Рейкьявик и Тромсё, когда оно наиболее яркое, но лучше всего искать места в арктической сельской местности.

«Северное сияние» хороши тем, что туроператоры годами гоняются за северным сиянием и могут найти лучшие места для потенциального наблюдения даже при низкой облачности.Большинство туроператоров даже предложат вам присоединиться к туру на следующий вечер, если вы не увидите северное сияние. Viator принимал нас в круизе за северным сиянием со специальными турами, и хотя наш круиз превратился в автобусный тур из-за сильного ветра, и мы не видели северного сияния, специальные туры любезно пригласили всех участников тура присоединиться к ним снова в любое время. ночь в течение следующего года.

Мы провели девять ночей в Исландии, а после кануна Нового года все оставшиеся ночи провели на исландских фермах, где мы могли буквально выйти из парадной двери, чтобы проверить, не наблюдается ли северное сияние.И это именно то, что мы сделали; мы устанавливаем наши будильники на каждый час между 23:00 и 2:00. Как бы ни было хреново вытаскивать себя из своей поджаренной теплой постели после того, как вы только что заснули, и пробуждать себя порывами холодного арктического воздуха, наше усердие однажды вечером окупилось.

Сразу после часа ночи и после того, как мы легли спать с сильным снегопадом и 100% облачным покровом, ветер сдул тучи, и на горизонте появилось очень слабое зеленое свечение. Мы быстро надели теплую одежду и вышли на улицу как раз вовремя, чтобы «Аврора» активизировалась.Невооруженным глазом его можно было увидеть только около часа, но мы наблюдали, как зеленый огонек вздымается и танцует в небе на завывающем ветру до самой последней секунды, когда он танцует.

Мы рекомендуем

Полный путеводитель Luxe Adventure Traveler по северному сиянию в Исландии

Совет: некоторые отели (например, отель Berg, где мы останавливались в Кефлавике, и отель Ranga на южном побережье Исландии) предлагают звонок для пробуждения Aurora. Обязательно спросите на стойке регистрации, так как у них часто есть охотники за Авророй, которые звонят ночному персоналу, чтобы предупредить их о наблюдениях.

6. При поиске северного сияния смотрите на север.

Это может показаться очевидным, но у нас с Тимом был именно этот спор во время нашей последней поездки за северным сиянием. Пока мы ждали первых признаков северного сияния, я сказал ему смотреть на север.

— Мы уже на севере, так что они могут начать где угодно, — возразил Тим.

Не поверив мне (типично!), я заручился помощью проводника по северному сиянию, чтобы подтвердить, что северное сияние почти всегда начинается с направления на север.

Отправляясь на охоту за северным сиянием в одиночку, убедитесь, что вы знаете, где находится север. Аврора непредсказуема и может быть очень недолгой. А когда он тусклый, он может выглядеть как тонкое серое или белое облако, поэтому его также легко не заметить.

Ваши шансы возрастут, если вы будете знать, в каком направлении смотреть. Если у вас плохое чувство направления, просто спросите у местного жителя. Северное сияние часто так же нормально, как восход солнца для местных жителей, и они могут сказать вам, в каком направлении они чаще всего появляются.

7. Северное сияние представлено в спектре цветов. В том числе бело-серые.

Уникальные цвета северного сияния создаются спектрами земных газов и высотой атмосферы, на которой происходит столкновение частиц солнца и земных газов. Нашему невооруженному глазу легче всего увидеть зелено-желтую часть спектра, где солнце излучает большую часть своего света. Чаще всего наблюдается зеленый цвет, но северное сияние также может казаться бело-серым.И пасмурная ночь, если вы никогда не видели их раньше, вы можете даже не быть полностью уверенными в том, на что смотрите.

Иногда северное сияние даже присутствует, но не видно невооруженным глазом. Мы сфотографировали несколько исландских лошадей возле нашей хижины после того, как подумали, что северное сияние исчезло. Мы не могли их видеть, но наша камера все еще могла.

Мы рекомендуем

Советы по фотографированию северного сияния

8.Северное сияние можно увидеть в полнолуние.

Еще одно заблуждение людей о том, как увидеть северное сияние, заключается в том, что вы не можете увидеть полярное сияние в полнолуние. Мы несколько раз снимали северное сияние в полнолуние, и нам очень понравился эффект. Луна освещает передний план и создает гораздо более иссиня-черное небо.

В полнолуние мы даже смогли сделать селфи северного сияния, когда охотились в одиночку. Без луны нам понадобился бы кто-то еще, чтобы нарисовать нас светом, и это техника, которую вы можете использовать, чтобы осветлить объект на переднем плане фотографии с длинной выдержкой, что делает селфи невозможным.

9. Ближе всего к Земле северное сияние находится на высоте 80 километров над поверхностью.

Иногда кажется, что северное сияние вырывается из гор, как лава из вулкана, но это всего лишь оптическая иллюзия. Ближе всего к Земле северное сияние находится на высоте 80 километров (50 миль) над поверхностью Земли. Для сравнения, самолеты летают на высоте около 10 километров над поверхностью.

Высота, на которой появляется северное сияние, влияет на его цвет.Различные столкновения атомов в магнитосфере создают различный цветовой спектр, в котором появляется северное сияние. Эти столкновения происходят на разных высотах.

Зеленый — наиболее распространенный цвет, в котором появляется северное сияние, и зеленый цвет появляется на высоте от 100 до 240 километров над поверхностью Земли. Синие и фиолетовые цвета встречаются ниже 100 километров, а красные — выше 240 километров.

10. Северное сияние не исчезнет.

Наш любимый кликбейтный заголовок статьи в прошлом году был «Последний шанс увидеть северное сияние, прежде чем оно исчезнет», подразумевая, что вы должны идти прямо сейчас, иначе у вас нет абсолютно никаких шансов увидеть северное сияние. Северное сияние НЕ исчезнет.

Однако ученые считают, что северное сияние становится ярче и становится более заметным в соответствии с активностью Солнца. У Солнца есть то, что ученые называют солнечным жизненным циклом, и он длится около 11 лет.Солнце в настоящее время приближается к своему солнечному минимуму, периоду наименьшей солнечной активности. С меньшим количеством солнечных пятен и солнечных вспышек ионизация и возбуждение частиц, необходимых для образования Северного и Южного сияний, происходят гораздо реже.

Это означает, что сейчас и в ближайшие несколько лет самое подходящее время отправиться в погоню за северным сиянием, потому что шансы увидеть его уменьшатся. Но они не исчезают совсем.

Купить этот пост

Взгляните на некоторые камеры, которые мы использовали и настоятельно рекомендуем для фотографирования северного сияния.

Эта статья содержит партнерские ссылки. Когда вы покупаете что-либо на Amazon или бронируете через наши партнерские сайты Booking.