Прикорневое окрашивание: Прикорневое окрашивание волос (до 5см)

Содержание

Окрашивание волос – Цены от 2 900 ₽

Красота с итальянским вкусом!

Представляем профессиональные косметические линии для волос премиум-класса из Италии Davines и Alfaparf . За счет высококачественного сырья, инновационных формул, ухаживающих и натуральных компонентов, а также благодаря широкой палитре красителей достигается идеальный интенсивный цвет. Наличие собственных лабораторий позволяет подбирать только высококачественные ингредиенты, разрабатывать уникальные формулы и осуществлять строгий контроль качества продукции.

Перманентное окрашивание EVOLUTION OF THE COLOR ALFAPARF – это совершенство безупречного ЦВЕТА ВОЛОС. Инновационная формула на основе гиалуроновой кислоты и без PPD обеспечивает совершенство цвета с полноценной заботой о волосах и коже головы:

  • осветление до 3 уровней
  • превосходное покрытие и длительная стойкость цвета
  • низкое содержание аммиака (средний показатель до 0,7%)
  • ослепительный блеск и превосходное качество волос

Окрашивание Тон-в -Тон COLOR WEAR ALFAPARF – больше , чем обычный краситель тон-в-тон!

  • это безаммиачные красители, предлагающие бесконечную вариацию салонных процедур.
  • это универсальность: от тонирования без проявления отросших корней до осветления до 2 тонов
  • это неотразимые оттенки
  • это невероятные эластичность и мягкость волос

Блондирование – это инновационная линия обесцвечивания для получения точных, персонализированных результатов, которые также бережно относятся к вашим волосам благодаря их эксклюзивной технологии защиты Bl-Bond complex. Bl-Bond complex работает как на поверхности волос, восстанавливая поврежденные участки, так и во внутренней части, проникая в волокна и реконструируя их. Результат идеальное обесцвечивание и защита волос.

Наш секрет красоты:

  • Исключительные ингредиенты итальянских линий
  • Уникальные техники, доведенные до совершенства
  • Индивидуальный подход для создания неповторимых результатов

Покраска корней волос в домашних условиях

Ухоженные, здоровые и красивые локоны являются главной гордостью любой женщины. Для придания яркости и дополнительной привлекательности многие прибегают к окрашиванию, которое имеет неприятный фактор — пряди достаточно скоро отрастают, а у корней появляется натуральный оттенок, который очень часто сильно различается от окрашенных локонов. Чтобы отросшие пряди не портили изящного внешнего образа, важно знать, как дома покрасить корни волос.

Окрашивание корней — это обязательная процедура для женщин с окрашенными прядями. Скорость роста волос у всех различная, но рано или поздно предательские волосы у корней все же появляются, а чтобы внешний образ от этого не портился, их необходимо регулярно подкрашивать. Разумеется, можно доверить процедуру прокрашивания корней профессионалам, то есть просто обратиться в салон красоты, но важно знать, что в целях экономии допускается окрасить корни и в домашних условиях.

Чтобы правильно провести процедуру прокрашивания корней прядей, необходимо знать и точно следовать определенным пунктам важных рекомендаций:

  • За 2-е суток до запланированного окрашивания требуется провести тес на аллергическую реакцию. Для этого необходимо размешать краску, которая будет в дальнейшем использоваться, и нанести небольшое количество на локтевой изгиб руки. Если в течение 2-х суток на коже не происходит никаких изменений, то можно смело использовать данный тип краски для окрашивания отросших прядей.
  • Отросшие пряди рекомендовано прокрашивать краской третей степени стойкости, так как оттеночные красители просто не справятся с возложенной на них задачей. Если волосы «покрыты» сединой и у корней отросли, то прокрасить их сможет только высоко стойкая краска.
  • Лучше не использовать некачественные и дешевые варианты красок, потому что в их составе содержится большое количество аммиака, который способен раздражать слизистую глаз, а также негативным образом влияет на состояние волос и, конечно, кожи головы.
  • Беременным будущим мамочкам, а также дамам в период лактации красить отросшие ряди красками с аммиаком строго воспрещено.
  • Так как отросшие прядки всегда отличаются по цветовому оттенку от основного объема шевелюры, то важно досконально точно соблюдать рекомендуемое время окрашивания, которое обязательно прописывается в инструкции, прилагаемой к красящему составу.
  • Перед нанесением красящего состава с поверхности прядей требуется удалить все укладочные средства. Не обязательно мыть голову перед процедурой окрашивания, особенно это касается сухого типажа волос.
  • Самостоятельно окрасить отросшие корни можно, но главная проблема такой процедуры — это возможное прокрашивание кожи около волосяного покрова. Чтобы избежать подобной неприятности, необходимо перед окрашиванием смазать кожу около висков, ушей, лба, шеи любым жирным кремом.
  • Даже если локоны растут очень быстро, не рекомендуется красить корни прядей чаще, чем раз в три недели.

Процесс окрашивание корней

Покраска корней требует тщательной подготовки, а также внимательного проведения соответствующей процедуры.

Выбираем красящее средство

Если прошлое окрашивание прядей проводилось в условиях салона красоты, то у мастера можно поинтересоваться номером и тоном типажа красящего средства. Если же узнать это не представляется возможным, то рекомендовано придерживаться следующих требований:

  • Для закрашивания седины идеально выбирать высоко стойкие красящие средства.
  • Обладательницам любого типажа волос необходимо подбирать краску, в составе которой имеются масла, витаминизированные составы, протеины.
  • При проведении самостоятельного окрашивания эксперименты не приветствуются, так как можно получить совершенно неожиданный результат. Правильно выбирать такой оттенок красящего средства, который не более чем на два-три тона будет различаться от первоначального цвета.

  • Количество краски необходимо подбирать в соответствии с длиной локонов. Если пряди длинные, то может потребоваться и 2, и 3 пачки красящего состава. На короткие локоны, а также пряди средней длины потребуется 1 упаковка краски.
  • Если требуется покрасить волосы, чтобы корни были темные, а остальная длина волос — светлая, то необходимо внимательно подбирать цветовые тона красящего состава. В данном процессе важна гармония, поэтому подобное окрашивание лучше проводить под тщательным руководством профессионала. Если же проводится самостоятельное окрашивание прядей в 2 тона, то часто используется следующая тактика: концы осветляются химическими осветлителями, а вот корни тонируются безаммиачными красителями.

Советы, которые помогут Вам самостоятельно окрасить отросшие корни волос:

Подготовительный этап

В подготовительный этап входит подбор необходимых инструментов:

  • небольшое полотенце или мягкая ткань, которой нужно будет укрыть плечи;
  • зажимы или же шпильки для прядей;
  • гребень с мелкими зубьями — для разделения волос на прядки;
  • стеклянная, пластмассовая или керамическая миска для разведения красящего состава;
  • специальная кисточка или мягкая губка для нанесения красящего состава;
  • жирный крем.

Окрашивание корней

Чтобы окрасить пряди самой себе, необходимо запастись терпением. Процедура окрашивания корней одинакова, но даже если окрашивание уже проводилось неоднократно, перед проведением непосредственной процедуры все же требуется тщательно изучить инструкцию, приложенную к красящему составу.

Техника балаяж (два цвета) — это окрашивание прядей, когда концы темные, а оставшаяся длина — светлая — выполняется следующим образом:

  • сначала окрашиваются корни;
  • затем прокрашиваются концы (концы прядей можно завернуть в мягкую фольгу, а можно оставить и в естественном состоянии, все зависит от желаемого результата оттенка прядей).

Следует указать, что процесс окрашивания только корней — это прекрасное решение для тех, кто желает преобразить внешность без окрашивания всей шевелюры.

Прикорневое окрашивание — инструкция:

  • Плечи укутываются заранее подготовленным полотенцем или мягкой тканью.
  • Тщательно расчесать локоны.
  • На кожу около волос нанести жирный крем.
  • При помощи гребешка разделить пряди на 4 пробора: сначала разделяются пряди посередине, затем происходит разделение волос от макушки и до области ушей.
  • 4 прядки закручиваются зажимом.
  • Развести красящий состав согласно приложенной инструкции.
  • Надеть защитные перчатки.
  • При помощи специальной кисточки или мягкой губки прокрасить пробор посередине. Именно он послужит дальнейшим ориентиром прокрашенных прядей.
  • Отделить один крупный локон, разделить его на много мелких прядок, при этом на каждую прядку в прикорневой зоне тщательно наносить красящий состав.
  • Аналогичное действие провести и с остальными локонами.
  • Чтобы не отличались корни прядей от остальной длины волос по цветовому оттенку, после прокрашивания корней всех прядок, необходимо аккуратно проработать красящим составом височную часть.
  • После всех процедур необходимо счесать локоны вверх, можно по желанию укутать голову полиэтиленовым пакетом и выдержать время, которое прописано в инструкции.
  • В завершении всех этапов окрашивания требуется тщательно промыть голову шампунем, а затем на локоны нанести стабилизирующий бальзам.
  • Нельзя сушить пряди после окрашивания феном, идеально дать им высохнуть естественным способом.

Скрытое окрашивание волос – что это такое и 26 крутых идей с фото

Это очень удобно! При желании вы можете «спрятать» цвет за прядями природных оттенков. А когда захочется — продемонстрировать окрашенные волосы с помощью укладки

Эта ситуация знакома, пожалуй, каждому мастеру-колористу: клиент, с одной стороны, хочет заметно освежить образ и даже задумывается о радикальных экспериментах с яркими цветами, а с другой — все-таки боится, что результат окажется слишком смелым. Исключить подобные страхи поможет техника скрытого окрашивания.

Что такое скрытое окрашивание волос?

Скрытое окрашивание — это техника, которая позволяет спрятать цветные пряди или даже целую «прослойку» яркого оттенка в основной массе волос так, чтобы их не было видно, пока вы не распустите волосы или не соберете их в прическу, открывающую «засекреченный» слой.

© butterflyloftsalon

Как правило, при потайном окрашивании волос цвет наносят на волосы средних или нижних слоев сзади. Иногда его распределяют не по всей длине, а «растягивают» по прикорневой зоне. Так окрашивание можно замаскировать еще надежнее.

Вернуться к оглавлению

Оттенки для скрытого окрашивания

Чаще всего скрытые пряди делают броскими по цвету — иначе нет никакого смысла: зачем прятать оттенки, выбор которых никак не связан с риском и смелыми решениями?

© fedorinaanna

Так как гамма доступных оттенков очень широка, определиться бывает трудно. Лучше всего — оценить, насколько тот или иной вариант подходит вам по цветотипу.

Фиолетовое окрашивание

На светлых волосах хорошо выглядят модные сейчас пастельные оттенки лаванды и сирени. Чаще всего к этим цветам добавляют немного розовой пастели. Брюнетки же делают скрытое окрашивание со «светящимся» фиолетовым неоном — более ярким и насыщенным. Потому что иначе скрытое окрашивание на черных волосах просто не будет заметно.

© mishellehair

Синее окрашивание

Оттенков синего (цвет сейчас на пике моды) очень много. Во-первых, конечно, синий электрик, который идет и брюнеткам, и шатенкам, и блондинкам. Еще один фаворит — нежно-голубой (он отлично выглядит на светлых волосах). Отдельный тренд — оттенок темного денима, синего с нотками темно-серого и темно-зеленого, которые делают его приглушенным, но от этого не менее выразительным.

© nika_name_92

Розовое окрашивание

В скрытом окрашивании можно использовать сразу несколько розовых оттенков — от пастельного до фуксии и неона. Соединяйте их с помощью градиента или носите на разных прядях.

© lonelinwess

Зеленое окрашивание

Кто-то выбирает очень мягкий и девичий мятно-зеленый оттенок. А кому-то больше по душе едкий кислотно-зеленый неон, который, кстати, хорошо сочетается с другими яркими цветами: синим, красным, розовым.

© toridar_hair

Красное окрашивание

Красный цвет точно затеряется в рыжих волосах, а вот блондинкам и брюнеткам его вполне можно взять за основу скрытого окрашивания.

© lorealhair

Скрытый блонд

Если у вас темные волосы и вы предпочитаете естественные образы, попробуйте спрятать под верхними слоями несколько светлых прядей. Этот акцент будет заметен в движении, если распустить волосы или собрать их соответствующим образом.

© lorealpro

Радужное окрашивание

© cryistalchaos

В скрытом виде контрастные оттенки не видны. Тем больший эффект произведет на окружающих «проявление» сразу нескольких цветов. Берите широкую палитру и создавайте эффектные радужные переливы.

Вернуться к оглавлению

Кому подойдет скрытое окрашивание?

Сомневаетесь, подойдет ли вам скрытое окрашивание? На самом деле ограничений нет. Каждый сможет подобрать вариант, который будет выглядеть гармонично.

Темные волосы

На темных волосах оптимальный контраст создадут неоновые оттенки.

© lorealhair

А если не хочется, чтобы яркость зашкаливала, скройте на средних слоях приглушенные оттенки зеленого, синего или, скажем, розового, чтобы они лишь мягко намекали на вашу любовь к экспериментам с цветом.

Русые волосы

На русых волосах даже достаточно сдержанные цвета будут заметны. Выбрать при этом можно практически любой оттенок — разве что пастель на них выглядит блеклой. Но если сначала обесцветить пряди, то и приглушенные оттенки смогут превратиться в полноценный акцент.

© listsalon

Светлые волосы

У блондинок самый широкий выбор: от молочной пастели до ослепительно яркого неона. И первое, и второе отлично сочетается с блондом и заметно выделяется на его фоне, но может быть искусно скрыто под верхним слоем волос.

© butterflyloftsalon

Рыжие волосы

Девушкам с рыжими волосами нужно подбирать для скрытого окрашивания оттенки, которые не будут сливаться с их природным оттенком. Поэтому красно-розовая гамма вряд ли подойдет. Ищите варианты, способные создать выразительный контраст с огненным фоном.

Вернуться к оглавлению

Техника скрытого окрашивания для волос разной длины

Для коротких волос

Спрятать цветные пряди, если волосы совсем короткие, вряд ли получится. Поэтому девушкам, которые носят стрижку пикси и высокое каре, колористы предлагают красить корни по нескольким центральным проборам. В этом случае игра цвета откроется окружающим только в том случае, если вы соответствующим образом зачешете волосы. С длиной чуть выше плеч можно уже смело красить нижние пряди.

© fedorinaanna

Для волос средней длины

Больше возможностей открывается для тех, кто носит волосы длиной до плеч или ниже. В этом случае уже можно сделать цветными целые пряди от корней до кончиков. Открыть свой секрет вы сможете, собрав волосы в низкий хвост или пучок.

© rastamamadread

Для длинных волос

В этом случае цветными можно сделать не просто несколько прядей, а целую секцию или даже слой волос на среднем уровне.

© nataliakop

Вариант с окрашиванием корней и «рястяжкой» цвета по направлению к середине тоже можно взять на заметку. Если сделать полупучок, собрав в него верхнюю часть волос, цветные корни предстанут взору окружающих во всей своей контрастной красе.

Вернуться к оглавлению

Модные фотоидеи причесок со скрытым окрашиванием волос

Секретный слой одного цвета

© ziabyrd

Самое простое — сделать контрастную одноцветную «прослойку» между слоями волос исходного оттенка. Она будет видна в движении, если вы распустите волосы, и может стать интересным сюрпризом в прическе.

Скрытая радуга

© butterflyloftsalon

Популярность использования широкой палитры цветов в скрытом окрашивании обусловлена тем, что эффект сюрприза усиливается многократно. Радуга — это, кстати, очень популярный вариант скрытого окрашивания, который поднимает настроение своей яркостью и хорошо выглядит как на броском фоновом цвете, так и на естественном.

Полосатое окрашивание

© butterflyloftsalon

Создавать радужный эффект в скрытом окрашивании можно по-разному. Один из вариантов — украсить пряди в спрятанном слое горизонтальными полосками. Границы между цветами можно размыть, чтобы получился градиент, или, напротив, оставить резкими и графичными.

© butterflyloftsalon

Пиксельное окрашивание

© olga_belkowa

Популярным трендом стало окрашивание с эффектом пиксельного рисунка на глади прямых волос. Из цветных квадратиков складываются целые узоры; кто-то готов демонстрировать их нон-стоп, а кто-то хочет, чтобы эта деталь удивила друзей и знакомых, например, на вечеринке. Тут-то и пригодится техника скрытого окрашивания.

Цветные корни

© fedorinaanna

Прикорневое окрашивание, как мы уже упоминали выше, оптимально для девушек с короткими волосами. Результаты эксперимента можно показать, сделав «правильный» пробор.

Скрытые рисунки

© fedorinaanna

Это, пожалуй, самый смелый вариант скрытого окрашивания. Часть нижнего слоя волос сзади коротко подстригают, после чего с помощью машинки выбривают рисунки и раскрашивают их.

© butterflyloftsalon

Под общей массой волос рисунка видно не будет, но все откроется, когда вы соберете волосы в высокую прическу.

Советуем почитать:

Вернуться к оглавлению

Как сделать скрытое окрашивание в домашних условиях?

Теперь разберемся, каким должен быть порядок действий, если вы хотите сделать скрытое окрашивание волос в домашних условиях.

  1. 1

    Выбор красителя

    Первым делом нужно решить, как долго вы готовы продержаться в экспериментальном образе. Не дольше недели или двух? Тогда выбирайте временный краситель, который постепенно смывается по мере использования шампуня. Например, бальзам Colorista Washout от L’Oréal Paris.

    Им, кстати, очень удобно пользоваться. Он больше похож на маску для волос. Ничего не нужно смешивать. Просто распределяете по нужным прядям и после 15–30 минут выдержки смываете средство водой. Можно также попробовать желе для окрашивания волос Colorista Hair Makeup. Подробнее о том, как его наносить, мы рассказывали в этом видео.

    Что касается долговременного результата, то добиться его поможет перманентный краситель. Яркие оттенки есть в коллекции The Vivids из серии Color Sensation от Garnier.

  2. 2

    Подготовка к окрашиванию

    Заранее протестируйте краситель на небольшом участке кожи. Подготовьте все нужные вам принадлежности: расческу с тонким хвостиком, кисть, емкости для краски, перчатки, полотенце (накиньте его на плечи, чтобы не испачкать одежду).

    © Getty

    Для процедуры долговременного окрашивания мыть голову не нужно. Если нужен временный эффект, то подходящие средства наносят на чистые волосы.

  3. 3

    Работа с цветом

    Смешайте компоненты красящего состава и нанесите на выбранные вами пряди, собрав оставшиеся волосы так, чтобы на них не попала краска. Ждать действия формулы придется от 15–20 до 30–40 минут — в каждом конкретном случае определить время экспозиции поможет инструкция. Затем останется только смыть краску водой и нанести закрепляющий цвет бальзам.

  4. 4

    Укладка

    В полной мере оценить результат поможет соответствующая укладка — например, волнами.

    © kawaicat_white

Вернуться к оглавлению

Правила ухода за волосами после окрашивания

Чтобы сохранить цвет (пусть и скрытый) на волосах как можно дольше, следуйте советам стилистов. Во-первых, вам понадобится шампунь для окрашенных волос. Благодаря мягкой формуле он почти не вымывает цвет. Попробуйте, например, «Fructis. Годжи. Стойкий цвет» от Garnier.

Во-вторых, чаще увлажняйте и питайте волосы. Добавьте в свой бьюти-рацион маски и несмываемый бальзам: они помогут избежать проблемы сухости волос, которая часто возникает после окрашивания.

Как вам идея скрытого окрашивания? Вы решились бы на такое? Расскажите в комментариях.

Вернуться к оглавлению

Цены – Салоны красоты Априори

Глаза, брови, губы

Перманентный макияж Коррекция бровей Наращивание ресниц Визаж и макияж

Для волос

Тонирование волос Мелирование волос Блондирование волос 3D Окрашивание Колорирование волос Окрашивание Шатуш Окрашивание Омбре Текстурирование Уход за волосами Окрашивание волос Стрижки

Для лица

Массажи лица Шугаринг Уход и чистка лица для мужчин RF лифтинг Биоревитализация Ботокс Чистка лица Фотоомоложение Маски для лица Контурная пластика

Для ногтей

Маникюр Парафинотерапия Дизайн ногтей

Для тела

Шугаринг Кавитация Интралипотерапия Пирсинг Депиляция LPG массаж

Инъекции

Ботокс Мезонити для лица Контурная пластика Ботулинотерапия

Окрашивание волос. Окраска волос только профессиональной косметикой

Сложность Расход Цена

Окрашивание I сложности:

– окрашивание волос в один тон;

– окрашивание прикорневой зоны.

40 / 60

90 / 120

150

3000 / 3200

4050 / 4450

5300

Окрашивание II сложности:

– пилинг + тонирование;

– окрашивание волос с предварительной пегментацией;

– сложное выравнивание цвета;

– создание переходных цветов от более темных корней к светлым концам;

– блондирование прикорневой зоны с последующим тонированием.

40 / 60

90 / 120

150 / 200

4200 / 4500

5950 / 6750

7950 / 8200

Окрашивание III сложности:

– мелирование с последующим тонированием;

– прикорневое мелирование с последующим тонированием;

– балаяж, омбре, шатуш, AirTouch с последующим тонированием.

40 / 60

90 / 120

150 / 200

4700 / 5500

7950 / 8750

10950 / 11200

Мелирование без тонирования

40 / 60

90 / 120

150 / 200

3500 / 4300

5300 / 6000

6500 / 6800

Make up для волос (экспресс тонирование) 25 / 30 / 40 2500 / 3000 / 4000
Смывка для волос

40 / 60

90 / 120

150 / 200

3500 / 4300

5300 / 6000

6500 / 6800

Насыщенный цвет волос – всегда будет предметом восхищения и гордостью любой девушки. Профессиональное окрашивание в нашем салоне поможет Вам добавить эффектности и индивидуальности в образ. Мастера FashionPlace используют при окрашивании волос профессиональную косметику LANZA. В Данную услугу входит:

  • Окрашивание в один тон
  • Сложное окрашивание
  • Брондирование волос
  • Окрашивание краской клиента
  • Процедура «смывка цвета»

Окрашивание волос – это самый быстрый и удобный способ преобразить стиль, освежить образ и, возможно, изменить жизнь. Помимо изменения имиджа, покраска волос помогает в таких случаях, как появление седины, оживление потускневшего цвета волос и прочего.

Конечно, многие пробовали красить волосы самостоятельно. Но, к сожалению, такие эксперименты не всегда приносят желаемый результат. Мало того, что в итоге вид может выйти просто неэстетичным, но еще существует риск повредить структуру волос, а это уже более серьезная проблема.

В магазинах всё чаще появляется некачественная краска, способная испортить волосы, не говоря уже выборе неподходящего тона. Бытовые красители, даже самого темного оттенка содержат в себе очень большое количество аммиака и перекиси (около 9-12%), происходит сильное воздействие на кутикулу, волосы становятся хрупкими и ломкими. А волосы, как известно, способны накапливать шлаки, происходит токсикация пигмента, в результате чего, цвет получается тусклым и некрасивым. Такие волосы трудно спасти без применения специальной помощи.

Во избежание неприятных ситуаций, связанных с неудовлетворительными итогами окрашивания, рекомендуется проводить такую процедуру исключительно в салонах у опытных мастеров.

Наши специалисты настоящие профессионалы своего дела способны удовлетворить вас на 100% и избавить от риска повреждения структуры волос.

Профессиональное окрашивание волос в салоне – это гарантия идеального результата. Мастера парикмахерской помогут определиться с оттенком и техникой!

Большой выбор техник окрашивания волос – лучший способ сохранить безупречную прическу. Наши мастера владеют техниками балаяж, шатуш, омбре, сомбре, брондирование и классическое мелирование. А также в процедуру окрашивания входит:

Окрашивание в один тон. Тонирование. Окрашивание краской клиента. Мелирование. Осветление. Процедура “смывка цвета”. Сложное окрашивание.

Кроме того, проведение подобной процедуры в нашей студии является гарантией того, что и волосяные корни, и кончики будут окрашены в равномерном порядке. Покраска волос в салоне является работой профессиональных стилистов, которые наносят краску, подбирают приемлемый цвет и дают дельный совет по уходу за волосяным покровом головы.

Таким образом, покрасить волосы не представляет никакого риска, потому что:

  1. Оно осуществляется мастерами своего дела
  2. В работе мы используем только профессиональные средства

Преимущества окрашивания в салоне красоты Fashion Place:

Процедура проводится на самом высоком уровне без риска и вреда для здоровья волос. В процессе применяются самые надежные средства от ведущих лидеров в индустрии по окрашиванию волос. Наши специалисты подберут оптимальный вариант для каждого клиента независимо от интересующей техники окрашивания. Наши мастера предоставляют современные рекомендации по стилю, моделированию прически. Мастера подбирают цвет для покраски волос, который сочетается с цветом кожи и глаз. При этом стилисты учитывают возраст женщины, её стиль и личные предпочтения. Приятная атмосфера салона красоты и продуманный интерьер позволят вам чувствовать себя как дома во время любой процедуры.

Приглашаем вас в салон красоты в Москве на Войковской и Балтийской, который ценит своих клиентов – Fashion place. Красота – это естественность и истинное удовольствие! И вы в этом убедитесь на личном опыте!

Окрашивание

Окрашивание в 1 тон/Тонирование (Estel)

Цена, руб

Прикорневое окрашивание (до 2 см) (короткие волосы)

1800

Прикорневое окрашивание (до 2 см) (средние-длинные волосы)

2000-2200

Короткие волосы

2000

Средние волосы (по плечи)

3000

Длинные волосы (до лопаток)

3500

Очень длинные волосы (от лопаток и ниже) 

от 4000

Окрашивание в 1 тон/Тонирование (Matrix)

Цена, руб

Прикорневое окрашивание (до 2 см) (короткие волосы)

2300

Прикорневое окрашивание (до 2 см) (средние-длинные волосы)

2500-2700

Короткие волосы

2500

Средние волосы (по плечи)

3300

Длинные волосы (до лопаток)

3900

Очень длинные волосы (от лопаток и ниже) 

от 4500

Тонирование при окрашивании корней (Estel)

Цена, руб

Короткие волосы

500

Средние волосы (по плечи)

600

Длинные волосы (до лопаток)

800

Очень длинные волосы (от лопаток и ниже)

1000

Тонирование при окрашивании корней (Matrix)

Цена, руб

Короткие волосы

700

Средние волосы (по плечи)

800

Длинные волосы (до лопаток)

1000

Очень длинные волосы (от лопаток и ниже)

1200

Сложное окрашивание/коррекция (Airtouch, шатуш, балаяж, колорирование, омбре) (Estel)

Цена, руб

Короткие волосы

3500

Средние волосы (по плечи)

5000

Длинные волосы (до лопаток)

6000

Очень длинные волосы (от лопаток и ниже) 

от 7000

Сложное окрашивание/коррекция (Airtouch, шатуш, балаяж, колорирование, омбре) (Matrix)

Цена, руб

Короткие волосы

от 4000

Средние волосы (по плечи)

от 5500

Длинные волосы (до лопаток)

от 6500

Очень длинные волосы (от лопаток и ниже) 

от 7500

Мелирование

 Цена, руб

Короткие волосы

3500

Средние волосы (по плечи)

4000

Длинные волосы (до лопаток)

4500

Очень длинные волосы (от лопаток и ниже) 

5000

Блондирование

Цена, руб

Прикорневое блондирование (до 2 см)

2000

Короткие волосы

2500

Средние волосы (по плечи)

3000

Длинные волосы (до лопаток)

3600

Очень длинные волосы (от лопаток и ниже)

от 4000

Декапирование одно нанесение

Цена, руб

Короткие волосы

1000

Средние волосы (по плечи)

1200

Длинные волосы (до лопаток)

1500

Очень длинные волосы (от лопаток и ниже)

от 2000

Препигментация

Цена, руб

Короткие волосы

400

Средние волосы (по плечи)

600

Длинные волосы (до лопаток)

700

Очень длинные волосы (от лопаток и ниже)

1000

Окрашивание волос | neomir.club

Наступило время менять имидж? Нужно напомнить себе и окружающим, что Вы – шикарная женщина или привлекательный мужчина, а не просто ценный сотрудник? Начните с окрашивания волос! Если Вы не еще не определились с выбором нового стиля, то Вы назовете, какой образ Вы хотите получить, а специалист neomir.club посоветует, какими техниками и оттенками для этого желательно воспользоваться.

Мы выполняем различные виды окрашивания. Можно это сделать в один цвет, можно выполнить мелирование, окрашивание с элюминированием, блондирование, шелковое окрашивание и многое другое. Для мужчин актуальным станет не только маскировка седины, но и тонирование разной стойкости, и создание эффекта выгоревших кончиков волос.

Результатом профессионального окрашивания станут здоровые блестящие волосы. Они получат насыщенный, без каких-либо вульгарных ноток, цвет, который точно станет Вашим украшением. Седина будет полностью закрашена, а корни, отрастая, не будут составлять контраст с основной массой волос.

С neomir.club Ваши волосы раскроют заложенную в них красоту!

Обращаем Ваше внимание на то, что данная информация носит исключительно информационный характер и ни при каких условиях информационные материалы и цены, размещенные на сайте, не являются публичной офертой. Окончательная стоимость услуг определяется по результатам обследования и консультации специалиста.

 

ОБЖИГАНИЕ ВОЛОС ОГНЁМ

Эксклюзивная программа восстановления и оздоровления волос. Идеально подходит тем, кто хочет отрастить здоровые и длинные волосы без стрижки каждый месяц. Создаётся липидная плёнка на поверхности волос, которая держится до 3-4 недель. Волосы становятся более плотными, блестящими и объёмными.

Наименование процедуры Стоимость (в зависимости от длины волос)
  Короткие волосы Средние волосы Длинные волосы Свыше 40 см
Обжигание волос огнём 2500 3000 3500 от 4000

 

 

ШЁЛКОВОЕ ОКРАШИВАНИЕ CHI
Наименование процедуры Стоимость (в зависимости от длины волос)
  Короткие волосы Средние волосы Длинные волосы Свыше 40 см
Окрашивание корней (1-2 см) (мытье + сушка) 2900 2900 2900 2900
Окрашивание волос в один тон (мытье + сушка) 3900 4500 5600 от 7000
Тонирование волос 3000 3600 5100 от 6400
Коррекция цвета 2600 3300 4700 от 5900
Сложное окрашивание (окрашивание в 2 цвета и более) от 6600 от 10400 от 14000
Прикорневое мелирование 3200 3200 3200 3200
Мелирование/Обесцвечивание волос 3200 3900 4900 от 6900
Мелирование/Обесцвечивание одной пряди 200 200 200 200
Декапаж 2600 3100 3800 от 6100
Глазирование волос 1900 3300 4800 от 6500
Авторское окрашивание (омбре, шатуш, балаяж) от 6600 до 14000

 

 

ПРОГРАММЫ ДЛЯ ВОЛОС И КОЖИ ГОЛОВЫ NASHI ARGAN

SPA-УХОД NASHI ARGAN

Концептуальная программа очищения, интенсивного увлажнения волос и кожи головы.

Наименование процедуры Стоимость (в зависимости от длины волос)
  Короткие волосы Средние волосы Длинные волосы Свыше 40 см
SPA-уход для сухих и ломких волос (без сильного повреждения) 1500 1800 2000 от 2300
SPA-уход для сильно повреждённых волос 1800 2100 2300 от 2600

 

 

SPA-УХОД NASHI ARGAN FILLER

Реставрирует структуру и стимулирует все естественные процессы оживления волос, делает их цельными и плотными.
Вослосы становятся напитанными, дисциплинированными и послушными.

Наименование процедуры Стоимость (в зависимости от длины волос)
  Короткие волосы Средние волосы Длинные волосы Свыше 40 см
NASHI ARGAN FILLER THERAPY 2500 3000 3500 от 4000
NASHI ARGAN FILLER SERVICE 1500 2000 2600 от 3000

 

 

ОКРАШЕВАНИЕ MATRIX
Наименование процедуры Стоимость (в зависимости от длины волос)
  Короткие волосы Средние волосы Длинные волосы Свыше 50 см
Окрашивание корней (1-2 см) (мытье + сушка)

1700

1700

1700

1700

Окрашивание волос в один тон (мытье + сушка)

1900

2200

2600

от 2800

Тонирование волос

1900

2100

2400

от 2700

Осветление без повреждения структуры волос

2300

2700

3500

3700

Мелирование волос (фольга)

2500

3500

4300

от 4700

Маска интенсивного воздействия (для окрашенных волос)

800

1000

1300

1700

Коррекция цвета

1500

1700

2000

от 2500

 

 

ОКРАШИВАНИЕ LEBEL
Наименование процедуры Стоимость (в зависимости от длины волос)
 

Короткие волосы

5-10 см

Средние волосы

10-20 см

Длинные волосы

20-40 см

Волосы  свыше

40 см

Окрашивание корней (1-2 см) (мытье + сушка)

2900 2900 2900 2900
Окрашивание волос в один тон (мытье + сушка) 3900 4500 5600 7000
Тонирование волос 3300 4000 5000 6300
Прикорневое мелирование 3200 3200 3200 3200
Мелирование/Обесцвечивание волос 3200 3900 4900 6900
Мелирование/Обесцвечивание одной пряди 200 200 200 200
Окрашивание в 2 цвета и более от 7000 от 9000 от 12000 от 14000
Цветовая баня 1500 2000 2500 от 3000
Декапаж 2600 3100 3800 6100
Коррекция цвета 3000 3700 4600 6200

 

 

ОКРАШИВАНИЕ REVLON
Наименование процедуры Стоимость (в зависимости от длины волос)
 

Короткие волосы

5-10 см

Средние волосы

10-20 см

Длинные волосы

20-40 см

Волосы  свыше

40 см

Окрашивание корней (1-2 см) (мытье + сушка)

2900 2900 2900 2900
Окрашивание волос в один тон (мытье + сушка) 3900 4500 5600 7000
Тонирование волос 3300 4000 5000 6300
Прикорневое мелирование 3200 3200 3200 3200
Мелирование/Обесцвечивание волос 3200 3900 4900 6900
Мелирование/Обесцвечивание одной пряди 200 200 200 200
Окрашивание в 2 цвета и более от 7000 от 9000 от 12000 от 14000
Цветовая баня 1500 2000 2500 от 3000
Декапаж 2600 3100 3800 6100
Коррекция цвета 3000 3700 4600 6200
Контуринг 3500 4300 5300 6600

 

 

ПРОГРАММЫ ДЛЯ ВОЛОС И КОЖИ ГОЛОВЫ LEBEL

ПРОГРАММА «ПРОСНИСЬ ГОЛОВА»

Обеспечивает полноценный уход за кожей головы, стимулирует рост волос, решает проблемы выпадения, создает непревзойдённое ощущение чистоты, свежести, прохлады.

Наименование процедуры Стоимость (в зависимости от длины волос)
 

Короткие волосы

до 7 см

Средние волосы

до 20 см

Длинные волосы

до 30 см

Волосы свыше

 30 см

Программа
«Проснись голова»

880 1100 1350 1650

 

ПРОГРАММА «ЖИЗНЕННАЯ СИЛА»

Программа направлена на молекулярное восстановление структуры волос и на защиту волос от любого вида химического воздействия. Программа проводится каждый раз непосредственно перед: окрашиванием, тонированием,
фитоламинированием.

Наименование процедуры Стоимость (в зависимости от длины волос)
 

Короткие волосы

до 7 см

Средние волосы

до 20 см

Длинные волосы

до 30 см

Волосы свыше

 30 см

Программа
«Жизненная сила»

990 1800 2700 3800

 

ПРОГРАММА «АБСОЛЮТНОЕ СЧАСТЬЕ»

Концептуальная программа восстановления и увлажнения волос и кожи головы на молекулярном уровне.

Наименование процедуры Стоимость (в зависимости от длины волос)
 

Короткие волосы

до 10 см

Средние волосы

до 20 см

Длинные волосы

до 30 см

Волосы свыше

 30 см

Программа
«Абсолютное счастье»

2000 4200 5700 6600

 

ПРОГРАММА «БЛЕСК И СИЛА»

Уникальная экспресс-программа, позволяющая восстановить баланс молекулярной влаги в структуре волос и кожи головы.

Наименование процедуры Стоимость (в зависимости от длины волос)
 

Короткие волосы

до 10 см

Средние волосы

до 20 см

Длинные волосы

до 30 см

Волосы свыше

 30 см

Программа
«Блеск и сила»

1100 2200 3300 4400

 

ЭКСПРЕСС-УХОДЫ LEBEL

Наименование процедуры Стоимость (в зависимости от длины волос)
 

Короткие волосы

до 7 см

Средние волосы

до 20 см

Длинные волосы

до 30 см

Волосы свыше

 30 см

Экспресс-уход 170 350 500 670
Экспресс-восстановление и защита 480 850 1250 2350

 

 

НАНОПЛАСТИКА

Био-протеиновое выпрямление «Coffee Green» (Honma Tokyo)
(без формальдегида, 100% выпрямление вьющихся волос)

Наименование процедуры Стоимость (в зависимости от длины волос)
  Длина волос до плеч Длина волос до лопаток Длина волос до середины спины Длина волос до поясницы
Нанопластика 4000 4500 5000 6000

 

 

КЕРАТИН

Кератиновое выпрямление «Coffee Premium All Liss» (Honma Tokyo)
(без формальдегида, выпрямляет сильно вьющийся волос, придаёт волосам эластичность и блеск)

Наименование процедуры Стоимость (в зависимости от длины волос)
  Длина волос до плеч Длина волос до лопаток Длина волос до середины спины Длина волос до поясницы
Кератиновое выпрямление 5500 6500 7500 8500

 

 

БОТОКС

Ботокс для волос «H-Brash Botox Capilar» (Honma Tokyo)
(без формальдегида, восстанавливает межклеточную мембрану в структуре волоса, уплотняет его, возвращает волосам прочность и эластичность)

Наименование процедуры Стоимость (в зависимости от длины волос)
  Длина волос до плеч Длина волос до лопаток Длина волос до середины спины Длина волос до поясницы
Ботокс 4000 4500 5000 6000

 

 

Актуальные цены, стоимость услуг уточняйте у администратора по телефону или лично.

Окрашивание корней | INVAM Международная коллекция культур (везикулярных) арбускулярных микоризных грибов

При взятии проб корней для обнаружения и/или измерения количества микоризных колоний, важно выбрать более тонкие, более волокнистые корни. Старые корни или корни из растения со стержневыми или другими грубыми корнями, могут иметь некоторое количество микоризы, но колонизация обычно разрежен и состоит только из гиф, которые часто наиболее заметны снаружи корни. Для растений с мочковатой корневой системой достаточно случайной выборки.Следует избегать темных пигментированных корней — использовать их означает проходить дополнительную процедуру. стадия отбеливания (обычно достаточно инкубации в 5% растворе бытового отбеливателя в течение 5-10 минут) но это надо проверять эмпирически).


После тщательной промывки для удаления всех частиц корни помещают в полиэтилен. кассеты, применяемые в медицине для обработки биопсийных тканей. Различные типы кассет продаются (Fischer, Ted Pella и др.), но для проб корней лучше всего подходят прямоугольные с 0.Отверстия 9 мм (фото справа). Кассеты с большими отверстиями приводят к побегу корней, особенно когда корни разрезаны на мелкие фрагменты. Укладывать корни свободно в кассетах (макс. 0,1-0,2 г) для максимальной инфильтрации растворов.


Очищение корней (удаление цитоплазматического содержимого из клеток) горячим 10% КОН. Используются разные подходы, от автоклавирования кассет в течение 5-10 минут кипятить их в какой-нибудь емкости на лабораторном столе. Многое зависит от количества проб обрабатываться одновременно.Обычно мы обрабатываем только 10-20 образцов за раз. Чтобы свести к минимуму перемешивание, мы предварительно кипятим КОН в большом стакане над горелкой Бунзена. и сразу добавляйте кассеты при выключенной горелке. Инкубационный период варьируется при толщине и ломкости корней, но обычно достаточно 10 минут. Старшая более толстые корни требуют более длительного времени инкубации. Потемнение раствора является признаком процесса клиринга.


Поскольку большинство гистологических красителей, используемых для этой процедуры, являются кислыми, важно, чтобы корни были закислены.Так промываем корни (4 -5 раз), а потом погружаем кассеты в 2% HCl в течение 15-20 минут. Для корней из сильно щелочных почв более длительная инкубация рекомендуется время. Если корни равномерно темные и микоризу трудно обнаружить см., то причиной часто является неадекватная очистка.


Та же процедура, описанная выше для очистки корней, проводится снова, только с 0,05% прямой синий или другой подходящий краситель (кислый фуксин, хлоразол черный Е). Морилку готовят путем смешивания с водой, глицерином и молочной кислотой в пропорциях 1:1:1 (об/об/об).Время инкубации варьируется, но лучше всего нам подходит 3-4 минуты. тепличные растения. На фото справа кассеты с корнями добавляли в красящий раствор, нагревали на лабораторном столе бунзеновской горелкой, горелка выключается, когда раствор начинает кипеть. Этот шаг можно сделать без применение тепла, но тогда инкубационный период должен быть продлен до 12 час


Морилка сливается в другую емкость (можно использовать повторно 1-2 раза после фильтрация через марлю) или выбрасывается в бутыль для отходов.Промойте кассеты с 4-5 сменами воды и хранить при 4°С в воде. Больше контраста между грибковыми ткани и фоновые растительные клетки получают, когда образцы хранились в воде в течение недели или дольше в холодильнике (избыток морилки вымывается из корней).


Для длительного хранения окрашенных корней мы помещаем их в стеклянные пробирки с завинчивающимися крышками. содержащую водно-глицериновую смесь (2:1 по объему) с 1-2 каплями 0,1% азида натрия при 4°С. Окрашивание сохраняется в грибковой ткани в течение > одного года.Корни можно хранить в фиксирующих растворах (например, в формалине), но только если вы хотите аллергия, рак или другие возможные проблемы со здоровьем.


Микориза, окраска 0,05% кислым фуксином в качестве альтернативного красителя

Каталожные номера

Филлипс, Дж. М. и Д. С. Хейман. 1970. Усовершенствованная процедура очистки корней и окрашивание паразитарных и везикулярно-арбускулярных микоризных грибов для экспресс-оценки инфекции. Сделки Британского микологического общества 55:158-161. (классическая бумага)

Коске, Р. Э. и Дж. Н. Гемма. 1989. Модифицированная процедура окрашивания корней для выявления ВА микоризы. Микологические исследования 92:486-505.

МакГонигл, Т. П., М. Х. Миллер, Д. Г. Эванс, Г. Л. Фэйрчайлд и Дж. А. Свон. 1990. Новый метод, дающий объективную оценку колонизации корней везикулярно-арбускулярным микоризные грибы. Новый фитолог 15:490-501.

Окрашивание и микроскопия колонизации микоризными грибами в консервированных эрикоидных корнях растений

Реферат

ИСТОРИЯ ВОПРОСА:

Визуализация колонизации эрикоидными микоризами с использованием традиционных методов основывается либо на свежих образцах, либо на образцах, хранящихся в KOH. Растущий интерес к изучению эрикоидной микоризации высветил потребность в методах, которые можно было бы использовать для консервированных образцов и которые легко реализовать с помощью общедоступного оборудования.

ЦЕЛЬ:

Целью данного исследования было усовершенствование традиционных методов окрашивания эрикоидных микоризных грибов и микроскопической визуализации сохранившихся корней эрикоидных микориз.

МЕТОДЫ:

Корни эрикоидной микоризы помещали в КОН или замораживали при –20 °C для длительного хранения. Традиционные методы окрашивания трипановым синим были модифицированы, чтобы уменьшить повреждение тонких микоризных гиф и клеток коры. Для четкой визуализации окрашенных микориз применяли метод микроскопии в темном поле с высокой интенсивностью света. Новое приложение сравнивали с другими широко используемыми практиками.

РЕЗУЛЬТАТЫ:

Окрашивание трипановым синим без хранения или очистки KOH позволило успешно окрасить корни эрикоидной микоризы, хранившиеся при –20 °C.Применение высокоинтенсивной темнопольной микроскопии позволило получить высококонтрастную визуализацию микоризных структур.

ВЫВОДЫ:

Модифицированный метод окрашивания трипановым синим оказался эффективным на образцах замороженных корней, при этом темнопольная микроскопия особенно эффективна для визуализации темных корней. Преимуществом этого метода является низкая стоимость и относительно быстрое время применения. Таким образом, этот метод является реалистичным вариантом для крупномасштабных анализов большого количества образцов, требующих длительного хранения.

1Введение

Подлесочная растительность бореальных лесов состоит преимущественно из эрикоидных растений, ягоды которых являются важным источником питания для многих организмов. Эрикоидные растения полагаются на микоризные грибы для доступа к органическим питательным веществам в суровых, бедных питательными веществами условиях [2]. Эрикоидные микоризные растения важны как для производства дикорастущих, так и культивируемых ягод в самых разных экосистемах. Это привело к возрастающему интересу к изучению эрикоидного микоризного симбиоза из-за его экологического значения, а также сельскохозяйственного потенциала.Было показано, что растения голубики высокорослой эрикоидной ( Vaccinium corymbosum L.), инокулированные микоризными грибами, улучшают рост и защищают от фитопатогенов при снижении потребности в удобрениях [4, 9, 11]. Недавние данные исследований генома грибов показывают, что виды эрикоидных грибов обладают значительной способностью к разложению органического вещества почвы, поскольку их геномы содержат большое количество генов, разрушающих углеводы [3]. Несмотря на эту способность, экосистемы, в которых преобладают эрикоидные и эктомикоризные грибы, хранят наибольшее количество наземного углерода на Земле [1].Поскольку их роль в наземной секвестрации углерода еще недостаточно изучена, исследования, посвященные эрикоидным растениям и их микоризным симбионтам, будут представлять большой интерес в будущем. Также необходимо исследовать функции эрикоидной микоризы на коммерческих полях голубики [10].

Корни эрикоидных растений имеют тонкую структуру, а эрикоидные микоризы обычно не образуют оболочки гиф, поэтому наличие колонизации эрикоидными микоризами можно подтвердить только с помощью микроскопии с помощью окрашивания гиф грибов.Существует несколько методов окрашивания корней эрикоидной микоризы для микроскопии, многие из которых основаны на оригинальной статье Филлипса и Хеймана [8]. Например, Koske & Gemma [5], Nestby et al. [7], Садовски и др. [10] и Scagel [12] использовали модифицированные методы Phillips & Hayman [8], включающие очистку корней в КОН с последующим подкислением и последующим окрашиванием. Как сообщают Koske & Gemma [6], обработка 10% КОН «жесткая и может привести к потере коры большей части корневой системы».Это особенно заметно в корнях, которые должны храниться в течение длительного времени и требуют хранения KOH или замораживания при -20 ° C, причем замораживание часто необходимо для молекулярных и химических анализов. Таким образом, существует очевидная необходимость в разработке и испытании методов окрашивания для микроскопии хрупких и тонких эрикоидных корней растений, которые хранились в замороженном виде. Кроме того, поскольку многие исследовательские проекты, связанные с эрикоидными растениями, предназначены не для изучения колонизации эрикоидной микоризой, а скорее для изучения других экологических или коммерческих аспектов эрикоидных растений, было бы полезно иметь возможность повторно анализировать образцы замороженных корней из таких экспериментов.Эта возможность позволит лучше понять экологию эрикоидной микоризы и ее значение для выращивания ягод.

Цель исследования заключалась в разработке простого, быстрого и щадящего метода окрашивания и визуализации сохранившихся эрикоидных корней растений для микроскопического обнаружения микоризных внутриклеточных колоний.

2Материалы и методы

Эрикоидные виды Vaccinium myrtillus , Vaccinium vitis-idaea и Calluna vulgaris экспериментально выращивались в течение 18 месяцев в гомогенизированном естественном лесном гумусе в условиях, имитирующих бореальный лесРастениям давали возможность естественным образом образовывать эрикоидные микоризные симбиозы внутри своих корней. Образцы корней промывали вручную холодной водопроводной водой для удаления излишков почвы.

2.1 Окрашивание

Образцы корней хранили при –20 °C и в 10% растворе КОН для проверки влияния длительного хранения (6 месяцев) на эрикоидные микоризные корни. Образцы корней были подготовлены для микроскопической визуализации микоризной колонизации с использованием метода окрашивания трипановым синим, модифицированного Филлипсом и Хейманом [8].Второй набор образцов хранили в 10% КОН в течение 1 дня или 3 дней при комнатной температуре и инкубировали в трипановом синем при 90 °C в течение 30 минут, чтобы проверить, предотвращает ли сокращение времени на обоих этапах повреждение тонких клеток коры корня. Замороженные образцы брали непосредственно при температуре –20 °C и инкубировали в растворе молочной кислоты и глицерина 1 : 1, содержащем 0,05% трипанового синего, при 90 °C в течение 30 минут. Замороженные корни не обрабатывали КОН для очистки и поэтому не требовали нейтрализации в HCl. По сравнению с тестируемыми методами длительного хранения свежие C.vulgaris помещали в трипановый синий на 10 минут при комнатной температуре.

Сразу после окрашивания трипановым синим все образцы корней помещали в раствор молочной кислоты и глицерина для обесцвечивания 1 :1 при комнатной температуре на 15 минут для удаления избытка красителя. Затем отдельные сегменты корней помещали на предметные стекла для микроскопии. Несколько корневых сегментов из каждого образца помещали параллельно под одно и то же покровное стекло размером 20×50 мм и заливали чистым раствором для обесцвечивания, который затем запечатывали по бокам прозрачным лаком для ногтей.

2.2Микроскопия

Микроскоп Zeiss Axioskop 2 Plus (Zeiss, Оберкохен, Германия) использовали в режиме проходящего света с ахроматическим-апланатическим универсальным конденсором (0,9 H D Ph DIC) в режиме темного поля и передней линзой на месте. Каждое подготовленное предметное стекло наблюдали через объектив A-Plan 40×/0,65 (Ph3 Var2) при максимальном освещении и полностью открытых диафрагмах. Высота конденсора была отрегулирована почти до верхнего максимального положения для обеспечения оптимального освещения образцов.Это было достигнуто путем отражения косых световых лучей в растворе для заливки, окружающем корневые волокна, что обеспечивает повышенный контраст корней и окрашенных клеток микоризы гриба. Тщательная настройка фокуса позволила визуализировать признаки колонизации грибков в нескольких плоскостях. Использование этого метода на более старых микроскопах, таких как Axioskop 1 (Zeiss, Оберкохен, Германия), не идеально, поскольку их источников света недостаточно, для четкой визуализации рекомендуется источник света мощностью 100 Вт.

Внимание: интенсивность света следует увеличивать до максимума только после того, как предметное стекло установлено на место для наблюдения, так как раствор для заливки уменьшает свет до безопасного для просмотра уровня.

2.3Оценка процента колонизации

Используя этот метод для четкой визуализации корней эрикоидной микоризы, можно количественно оценить колонизацию с помощью метода увеличенных пересечений [6]. Этот метод выполняется путем регистрации статуса микоризной колонизации каждого корневого волокна, когда он пересекается перекрестием окуляра вдоль вертикального разреза при увеличении в 400 раз.Обычно по длине слайда делается от 50 до 200 вертикальных разрезов. Этот метод позволяет проводить простой анализ колонизации на каждом пересечении перекрестия окуляра.

3Результаты

Хранение эрикоидных корней в 10% КОН в течение 1 и 3 дней сильно повреждало клетки коры всех тестируемых видов, при этом почти все корни полностью разрушались (рис. 1А). Непосредственное окрашивание свежих корней C. vulgaris (рис. 1B) позволило получить высококачественную темнопольную микроскопическую визуализацию грибковых структур, но метод лиофилизации дал еще лучшие результаты, даже после длительного хранения корней при –20 °C ( Инжир.1С). Визуализация микоризной колонизации методом замораживания красителя дала наилучшие результаты также с микоризными корнями V. myrtillus и V. vitis-idaea (рис. 2A и 2B). Микроскопия в темном поле с высокой интенсивностью света (рис. 3А) обеспечила превосходную визуализацию клеток корней по сравнению с традиционной микроскопией в светлом поле (рис. 3В).

Рис.1

(A) Корни C. vulgaris после обработки KOH и окрашивания трипановым синим, что привело к полной потере клеток коры корня.(B) Свежие корни C. vulgaris после окрашивания трипановым синим в течение 10 минут при комнатной температуре и проявления внутриклеточного спирализации гиф (HC). (C) Корни микоризы C. vulgaris после замораживания при –20 °C и окрашивания трипановым синим и выявления внутриклеточного спирализации гиф (HC). Бар = 50 мк м.

Рис. 2

(A) Корни микоризы V. myrtillus после замораживания при –20 °C и окрашивания трипановым синим с обнаружением внутриклеточного спирализации гиф (HC).(B) Корни микоризы V. vitis-idaea после замораживания при –20 °C и окрашивания трипановым синим и выявления внутриклеточного спирализации гиф (HC). Бар = 50 мк м.

Рис.3

(A) C. vulgaris корни микоризы, визуализированные с помощью темнопольной микроскопии с высокой интенсивностью света. (B) Сравнительная визуализация тех же корней микоризы C. vulgaris с использованием светлопольной микроскопии. Бар = 50 мк м.

4Обсуждение

Комбинированные методы окрашивания и микроскопии, описанные здесь, обеспечивают хорошую визуальную четкость и обнаружение колонизации эрикоидной микоризой в корнях, замороженных для последующего анализа, с дополнительными преимуществами простоты, быстрого применения и низкой стоимости.С практикой приготовление предметного стекла окрашенных корней эрикоидной микоризы занимает менее одного часа, а время микроскопии сокращается, поскольку метод темного поля с высокой интенсивностью света облегчает наблюдение микоризных структур в нескольких фокусных плоскостях. Во-первых, окрашивание микоризных гиф было успешным после замораживания эрикоидных микоризных корней при -20 °С, при сохранении тонких гиф на поверхности корней и внутренних структурах гиф. Традиционные методы описывают очистку корней в KOH с последующей нейтрализацией и окрашиванием HCl, что, как было показано в нашем случае, повреждает тонкие эрикоидные корни растений и любые гифы на них или внутри них.Поскольку микроскопия, используемая в этом методе, обеспечивала повышенную четкость зрения и освещенность, можно было наблюдать микоризацию даже в темных клетках коры корня. Следовательно, этап очистки с использованием KOH был совершенно ненужным, и хрупкие структуры гиф были сохранены.

По сравнению с более совершенными и потенциально дорогостоящими методами визуализации, такими как дифференциально-интерференционный контраст (ДИК) или электронная микроскопия, высококачественная микроскопия микоризы с использованием темнопольной микроскопии имеет преимущества.Этот метод требует минимальной подготовки и достижим на большинстве современных световых микроскопов без дорогостоящего дополнительного оборудования. Возможность четко наблюдать микоризные структуры уменьшает неопределенность при идентификации микоризной колонизации и обеспечивает более точную оценку частоты колонизации.

Основным преимуществом этого метода является короткое время применения, быстрое окрашивание и простая микроскопия, обеспечивающие возможность анализа большого количества образцов, которые также можно сохранить путем замораживания при –20 °C, что позволяет проводить дальнейшие молекулярные и химические анализы.Сокращение времени анализа при коммерческом производстве ягод или экологических исследований в полевых масштабах имеет решающее значение для получения результатов. Возможности этого метода могут становиться все более актуальными с растущим интересом к использованию эрикоидной микоризы в коммерческих целях, а также с текущими исследованиями, которые указывают на потенциальную важность эрикоидной микоризы в глобальном поглощении углерода. Представленный метод обеспечивает успешное окрашивание и микроскопию замороженных образцов корней эрикоидной микоризы.Таким образом, хранящиеся в морозильнике образцы эрикоидных корней из старых завершенных экспериментов могут быть повторно проанализированы для количественной оценки колонизации эрикоидной микоризой.

Конфликт интересов

У авторов нет конфликта интересов, о котором необходимо сообщить.

Благодарности

Авторы благодарят Академию Финляндии за поддержку этой работы (номера грантов 292699, 293365).

Каталожные номера

[1]

Аверилл С., Тернер Б.Л. , Финци А.С. . Опосредованная микоризой конкуренция между растениями и редуцентами способствует накоплению углерода в почве. Природа. 2014; 505 (7484): 543–5.

[2]

Кэрни Дж.В. , Мехарг А.А. . Эрикоидная микориза: партнерство, использующее суровые эдафические условия. Европейский журнал почвоведения. 2003;54(4):735–40.

[3]

Колер А. , Куо А. , Надя Л.Г. , Морин Э., Барри К.В. , Бускот Ф. , Канбек Б. , Чой С. , Цихоцкий Н. , Клум А. , Колперт Дж. . Конвергентные потери механизмов распада и быстрый оборот генов симбиоза у микоризных мутуалистов. Генетика природы. 2015;47(4):410–5.

[4]

Корон Д. , Гогала Н. . Использование микоризных грибов при выращивании растений голубики ( Vaccinium corymbosum L.). Acta Horticulturae. 2000;525:101–6.

[5]

Коске Р.Э. , Джемма Дж.Н. . Модифицированная процедура окрашивания корней для выявления микоризы VA. Микологические исследования. 1989;92(4):486–8.

[6]

МакГонигл Т.П. , Миллер М.Х. , Эванс Д.Г. , Фэирчайлд Г.Л. , Лебедь Дж.А. . Новый метод, дающий объективную меру колонизации корней везикулярно-арбускулярными микоризными грибами. Новый фитолог. 1990;115(3):495–501.

[7]

Нестби Р., Крогстад ​​Т. , Джонер Э. , Воник М. . Влияние удобрения NP на развитие голубики европейской (Vaccinium myrtillus L.) на возделываемых землях в центральной части Норвегии. Журнал исследований ягод. 2014;4(3):147–57.

[8]

Филлипс Дж.М. , Хейман Д.С. . Усовершенствованные процедуры очистки корней и окрашивания паразитарных и везикулярно-арбускулярных микоризных грибов для быстрой оценки инфекции. Труды Британского микологического общества.1970;55(1):158-IN18.

[9]

Продорутти Д. , Перто И. , Жионго Л. , Гесслер С. . Голубика высокорослая: выращивание, защита, селекция и биотехнология. Европейский журнал растениеводства и биотехнологии. 2007;1(1):44–56.

[10]

Садовский Дж.Дж. , Хэнсон Э.Дж. , Шильдер А.М. . Колонизация корней эрикоидной микоризой и темными септированными эндофитами на органических и обычных полях черники в Мичигане.Международный журнал фруктовой науки. 2012;12(1-3):169–87.

[11]

Скагель CF . Инокуляция эрикоидными микоризными грибами изменяет использование удобрений для сортов голубики высокорослой. Хорт Наука. 2005;40(3):786–94.

[12]

Скагель CF . Специфические для изолята реакции укоренения черенков Leucothoe fontanesiana на инокуляцию эрикоидными микоризными грибами. Журнал садоводческой науки и биотехнологии.2005;80(2):254–62.

[13]

Тимонен С. , Синкко Х. , Сан Х. , Сиетио О.М. , Ринта-Канто Дж.М. , Кихери Х. , Хейнонсало Дж. . Эрикоидные корни и микосферы управляют специфическими для растений бактериальными сообществами в гумусе бореальных лесов. Журнал микробной экологии. 2016). doi: 10.1007/s00248-016-0922-6

Окрашивание нематод в корнях растений

Окрашивание нематод в корнях растений

Окрашивание нематод в тканях растений

Ред.30.10.2019

Натриево-гипохлоритно-кислотно-фушиновый метод (Byrd et al., 1983).

Очистка корневой ткани

1. Промойте корни водой и поместите их в химический стакан на 150 мл. Большой корень системы могут быть разрезаны на секции для окрашивания.

2. Добавьте 50 мл водопроводной воды и соответствующее количество хлорного отбеливателя (5,25% NaOCl) для очистки корневой ткани. Замочите корни на 4 минуты в растворе NaOCl. раствор и время от времени взбалтывать.Предлагаемые рекомендации по количеству добавляемого отбеливателя:

    а) 10 мл 5,25% NaOCl для молодых корней.
    б) 20 мл 5,25% NaOCl для корней умеренно возраст.
    c) 30 мл 5,25% NaOCl для пожилых и старше одревесневшие корни.

Окрашивание корневых нематод

3. Промойте корни проточной водопроводной водой в течение примерно 45 секунд, а затем погрузите их в воду на 15 минут, чтобы удалить остатки NaOCl, которые могут влияют на окрашивание кислотным фускином.

4. Слейте воду и перенесите корни в стеклянный стакан с 30-50 мл водопроводная вода.

5. Добавьте в воду 1 мл маточного раствора кислотно-фушинового красителя и кипятите в течение около 30 секунд на плите или в микроволновой печи. Для подготовки запаса раствора кислого фускина, растворить 3,5 г кислого фускина в 250 мл уксусной кислоты и 750 мл дистиллированной воды.

6. Охладите раствор до комнатной температуры, слейте пятновыводитель и промойте. корни в проточной водопроводной воде.

Очистка корней

7.Очистите корни кипячением в 20-30 мл глицерина, подкисленного небольшим количеством капли 5 н. HCl.

8. Распределите корни в небольшом количестве глицерина на крышке чашки Петри, осторожно прижмите дном чашки Петри к крышке и наблюдайте под препаровальный микроскоп. Вместо чашки Петри можно использовать пару стеклянных чашек. тарелки. Корни можно хранить в подкисленном глицерине с небольшой потерей контраста. между нематодами и корнями.

Артикул:

Берд, Д.У., младший, Т. Киркпатрик и К.Р. Баркер. 1983. Усовершенствованная техника для очистки и окрашивания растительных тканей для обнаружения нематод. Журнал нематологии 14:142-143.

Вернуться в меню методов

(PDF) Простой метод синего окрашивания арбускулярной микоризы и других корневых грибов

и молекулярной биологии в Тулейнском университете

, в мае был избран в Национальную академию наук

.Избрание в Национальную академию, которая служит национальной

al консультативной группой по вопросам науки,

техники и медицины, является одной из

высших наград, присуждаемых в области науки. Доктор Беннет будет лишь вторым

действующим членом Академии в Обществе,

вместе с Т.Н. Тейлор из Университета

штата Канзас.

Д-р Беннетт широко известна своим

вкладом в исследования, обучение и

обслуживание.Ее избрание в Национальную академию

является признанием ее плодотворного вклада в области

производства вторичных метаболитов грибами и промышленной микробиологии. Она является активным инструктором с обязанностями

на многих курсах, и ее превосходство в обучении и консультировании

признано многочисленными наградами. Ее послужной список

в Тулейне и в профессиональных обществах ошеломляет.

Др.Беннетт был соредактором пяти книг и работал редактором

в двенадцати различных журналах и сериях книг. Члены MSA могут быть лучше всего знакомы с д-ром Бен-

нетт по ее работе в качестве главного редактора журнала

MYCOLOGIA с 2002 по 2004 год, в период крупных

изменений в журнале, включая право собственности. переход от Ботанического сада Нью-Йорка

к MSA, публикациям в режиме онлайн

и, что наиболее важно,

переход от бумажной к полностью электронной системе представления, рецензирования и публикации

.Доктор Беннетт наблюдал за всеми

этой суматохой с апломбом, и теперь, когда все

эти изменения благополучно вступили в силу,

трудно представить, как они

управлялись за такой короткий период времени.

Однако мы не можем считать доктора Беннета своим

. Среди других должностей в

Американском обществе микробиологии,

она была его президентом, и на протяжении всей своей карьеры

играла важную роль в представлении грибов в широкой сфере

микробиологии, особенно на международном уровне.Она

входит в очень небольшое число биологов-грибков

, являющихся членами Национальной академии, и она уверена, что

будет сильным и эффективным защитником микологии. Итак,

с удовольствием и гордостью мы поздравляем Джоан с ее

избранием в Национальную Академию.

Дэвид М. Гейзер

[email protected]

свет помогает при наблюдениях в этом процессе, хотя он не является существенным.

6. Подкислите корни 1 % HCl или другой кислотой. Можно видеть, что подкисление

работает, потому что корни сразу же становятся светлее

. Переместите корни в подкисленные чернила или

добавьте чернила с помощью пипетки непосредственно в подкисленные корни.

Корни можно исследовать под микроскопом примерно через

30 минут, хотя окрашивание обычно улучшается в течение более длительного

периода. Лучше всего оставить их минимум на 4 часа, а лучше

на ночь.Их можно хранить в подкисленном глицерине + чернила в

определенно. Рекомендуется обесцвечивание в течение нескольких часов в подкисленном

глицерине, что приводит к улучшению четкости и контрастности

, но если кто-то торопится, окрашенные фрагменты корня

можно сразу же перенести на подходящую среду на ми-

предметные стекла для наблюдения. Поливиниловый спирт лактоглицерин

эрол (PVLG) (Omar, Boland & Heather 1979) дает полупостоянную основу

(сохраняется много лет) или подкисленный глицерин

можно использовать, если нет необходимости в более длительном срок

сохранение образцов.

Этот метод еще больше снижает использование неприятных

химикатов по сравнению с методом чернил и уксуса

. Тем не менее, все рекомендации по охране труда и технике безопасности

и правила должны соблюдаться при использовании кислот, разбавленных или иных

или горячих щелочных растворов.

Ссылки: Omar, M.B., Bolland, L. & Heather, WA

(1979). Бюллетень Британского микологического общества 13, 31-

32.; Vierheilig, H., Coughlan, A.P., Wyss, U. & Piché, Y.

(1998). Прикладная экологическая микробиология 64, 5004-5007.

Christopher Walker

Королевский ботанический сад, Эдинбург

[email protected]

Джоан Беннет Избрана в Национальную академию наук

Bennett

Mycorrhizal Associations: Methods for Exx.

A. Как были созданы изображения

Большинство изображений микоризных ассоциаций, представленных на этом сайте, были сделаны относительно простыми и недорогими методами.Микоризные изображения представляют собой целые очищенные корни или относительно тонкие поперечные срезы корней, сделанные вручную с помощью острого лезвия бритвы. Процедуры окрашивания и микроскопии, используемые для того, чтобы сделать видимыми гифы грибов, подробно объясняются в подразделе C, в то время как более конкретные окрашивания для структур растений кратко представлены ниже.

B. Информация о безопасности

Все ученые и преподаватели, использующие химические вещества, обязаны получать актуальную информацию о безопасности материалов, которые они используют сами или просят использовать другие.Микоризные ученые обычно используют химические вещества, которые считаются опасными. Информация о безопасности предоставляется поставщиками химикатов и источниками, перечисленными ниже.

C. Очистка и окрашивание корней микоризы

Следующие разделы являются выдержками из книги: Brundrett M, Bougher N, Dell B, Grove T, Malajczuk N. 1996. Работа с микоризой в лесном и сельском хозяйстве (глава 4.2, стр. 179-183). См. Vierheilig et al. (2005) для обзора всех методов окрашивания микоризных грибов в корнях.

Схемы на этой странице также доступны для скачивания в формате pdf.

Оборудование и реактивы
  • ~60 % этанол или метанол (об./об.) консервант корней
  • 10 % КОН (масса/объем гидроксида калия), растворенный в воде. Это экзотермическая реакция – используйте термостойкий контейнер!
  • 0,03 % мас./об. Хлоразола черного E in (CBE) в лактоглицерине (1:1:1 молочная кислота, глицерин и вода). Растворите CBE в воде перед добавлением равных объемов молочной кислоты и глицерина
  • 0.05% вес/объем трипанового синего в лактоглицерине (1:1:1 молочная кислота, глицерин и вода)
  • 5 % Чернила на уксусе
  • Лактоглицерин или 50% раствор глицерина в воде (об./об.) для обесцвечивания и хранения окрашенных корней
  • молочной кислоты и глицерина пищевого качества достаточно, и их можно приобрести оптом
  • автоклав (121°C), водяная баня или печь (60-90°C) для нагрева образцов корней для очистки и окрашивания
  • устойчивые к автоклавированию стеклянные банки или пробирки для образцов
  • мелкоячеистое сито (± 100 мкм) для предотвращения потери корней при смене растворов
  • тонкие щипцы и диссекционные иглы для переноса корней
  • пластиковые флаконы с плотно закрывающимися крышками для хранения образцов

Введение

Структуры, продуцируемые VAM-грибами, невидимы в свежем виде. корни, потому что внутренние структуры скрыты натуральные пигменты и содержимое клеток корней.Пока целый Корни ВКМ часто можно идентифицировать при наблюдении с помощью диссекционного микроскопа внутренние детали этих ассоциаций выявляются удаление пигментов в клетках корней и гифах мантии. Клиринг процедуры, в которых используются химические вещества, такие как горячая щелочь, для удаления содержимого клетки и пигменты клеточных стенок, являются ценным методом для просмотра внутренних особенности в тканях растений (Gardner 1975). Грибковые структуры в растении ткани можно наблюдать с помощью красителей, которые связываются с грибковыми гифы без особого фонового окрашивания очищенного растения материал.Пятна, такие как трипановый синий, хлоразол черный E (CBE) в лактоглицерине или чернила в уксусе. используются для окрашивания микоризных структур, очищен нагреванием в КОН (Bevege 1968, Phillips & Hayman 1970, Kormanik & McGraw 1982, Brundrett et al. 1984, Vierheilig et al. 1998). Эта процедура описана ниже.

Предупреждения по технике безопасности!!!
  1. 10% w/v KOH используется для очистки корней. Следует соблюдать осторожность, чтобы избежать контакта кожи с этим едким химическим веществом! Используйте перчатки, защитные очки и т. д.
  2. Ядовитый химический фенол, который традиционно входит в состав некоторых красителей, не следует использовать! – его отсутствие мало повлияет на качество окрашивания.
  3. Chlorazol black E и трипановый синий предположительно являются канцерогенами (как и многие другие биологические красители — Coombes & Haveland-Smith 1982)! Используйте перчатки, чтобы защитить руки при использовании пятновыводителей, и следите за тем, чтобы пыль не вдыхалась и не попадала в глаза при работе с красящими порошками.
  4. Консерванты на основе формалина вредны для здоровья . Консервация растительных образцов метанолом или этанолом также работает и намного безопаснее.
  5. См. листы безопасности для получения последней информации об используемых вами химикатах.
1. Образцы корней

Процедуры очистки и окрашивания требуют образцов корней, были отмыты от земли. Это обязательно что объемы КОН или красящего раствора достаточны для количество обрабатываемых корней и что корни не плотно слипшиеся – для равномерного контакта с решения.Часто лучше нарезать корни на части длиной 2-4 см. сегменты перед их очисткой. Возможно, потребуется под- разделите или отберите большие объемы корней, чтобы получить хорошее Результаты. Тонкие корни древесных растений также можно отделить из грубых корней, после определения их доли в Общая корневая система.

2. Очистка корней КОН
  1. KOH 10% вес/объем обычно используется для очистки корней. Клиринг процедуры требуют образцов корней, которые не более 1-2 г.Многие опубликованные микрофотографии VAM показывают корни, которые были недостаточно очищены, возможно, из-за низких температур, короткое время или большие выборки. Корни, которых недостаточно очищенный, все еще будет иметь содержимое клеток, которое скрывает микоризный структуры, а чрезмерно очищенные корни могут разрушаться.
  2. Очистка корней выполняется быстрее всего в автоклаве, который обеспечивает наибольшую эффективные средства обработки образцов. Автоклавные жидкости цикла 15-20 минут при 121°C обычно достаточно. Образцы, содержащие старые корни, корни с обильным содержанием фенолов, или собранные в поле корни могут потребовать дополнительной очистки (25-60 минут).Используйте стойкие к автоклавированию стеклянные контейнеры, заполненные менее чем на одну треть, чтобы избежать перелив в автоклаве. Широкие контейнеры работают лучше, чем высокие узкие трубы.
  3. Корни также можно очищать на водяной бане, нагревая КОН. до 60-90°С. Время, необходимое для этот метод широко варьируется – корни молодых растений обычно требуется всего 2-4 часа, но образцы собранные в полевых условиях или сильно пигментированные корни могут потребовать много дольше очищаться (от 5 часов до нескольких дней).Один час осветления при 60°C примерно эквивалентен 5 минут в автоклаве при 121°C.
  4. Очищенные корни отбрасывают на мелкое сито и промывают водой или разбавленной кислотой в несколько раз перед переносом их в красящий раствор.
3. Окрашивание корней хлоразольным черным Е, трипановым синим или чернилами
.
  1. Для детального микроскопического исследования очищенные корни можно окрасить хлоразолом черным E (CBE) в растворе лактоглицерина. (Брандрет и др.1984). Оптимальная концентрация пятна будет зависит от источника красителя и используемой микроскопической процедуры. 0,03% мас./об. в большинстве случаев лучше всего, но лучше попробовать диапазон концентрации (0,1%, 0,03%, 0,01%) при использовании этого процедура с новым типом корней или при использовании нового источника красителя.
  2. Корни окрашивают нагреванием в течение нескольких часов при 90°С или 15 минут в автоклаве с жидкостным циклом при 121°C или оставив их в окрашивающем растворе при комнатной температуре на один или несколько дней.Красящий раствор можно использовать повторно несколько раз, фильтруют через складчатую марлю или тонкую нейлоновую сетку после каждого использования (для удаления фрагменты корня), пока он не станет прозрачным.
  3. Корни также можно окрашивать трипановым синим (Bevege 1968, Филлипс и Хейман, 1970; Корманик и МакГроу, 1982). А концентрация 0,05% вес/объем в лактоглицерине часто используется для окрасить очищенные корни, как описано выше. Окраска трипановым синим изображения имеют более низкий контраст, чем окрашенные с помощью CBE (Брандрет и др.1984). Однако трипановый синий окрашивание адекватно для оценки уровней колонизации, где цветовой контраст может быть полезным. Кислотный фуксин и Хлопковая синь также может быть использована для окрашивания грибов в корнях, но быстро растушевываются и дают низкоконтрастные изображения (Brundrett и другие. 1984).
  4. В недавно разработанном методе окрашивания используются чернила и уксус (Vierheilig et al. 1998, 2005). Этот раствор для окрашивания состоит из 5% чернил, разведенных в уксусе (5% уксусная кислота). Окрашивание черными чернилами для письма (Shaeffer Jet Black, Cross Black, Pelikan Black) и некоторыми синими чернилами (Pelikan Blue) дает хорошие результаты окрашивания.
4. Работа с темными корнями
  1. Длительное время очистки с помощью КОН часто приводит к удалению большего количества фенольные пигменты из корней, но могут быть неуместны, если образцы корней склонны к распаду или содержат связанные со стенками вторичные метаболиты, устойчивые к очистке.
  2. Отбеливание после очистки щелочной перекисью водорода (0,5% NH 4 OH и 0,5 % H 2 O 2 по объему в воде) эффективно удаляет любые фенольные соединения, оставшиеся в очищенных корнях (Bevege 1968, Корманик и МакГроу, 1982).Время, необходимое для образования корней обесцвечивание в этом растворе варьируется между образцами. Этот процедуру следует использовать с осторожностью, поскольку последующие может уменьшиться окрашивание гиф микоризных грибов. Отбеливание перекисью водорода очищенных корни особенно полезен для выявления сети Хартига в целые корни внеклеточного матрикса (Nylund et al. 1982, Brundrett er al. 1990).
  3. Окрашивание CBE и трипановым синим одревесневшие или опробковевшие клеточные стенки в корни, особенно ксилема, энтодермальные и экзодермальные клетки, как а также гифы грибов.Это окрашивание не может быть полностью устранены путем очистки или отбеливания, но не скроет микоризные детали если корни достаточно раздавлены под покровным стеклом.
5. Альтернативные методы
  1. Витальные процедуры окрашивания, определяющие содержание сукцината активность дегидрогеназы может быть использована для подтверждения того, что Перечисленные гифы микоризных грибов метаболически активны (Vierheilig et al. 2005). Однако оценка арбускулярной колонизации уровни предоставляют аналогичную информацию.
  2. Модификации стандартных процедур очистки и окрашивания были предложены из соображений безопасности. Грейс и Стрибли (1991) предполагают, что метиловый синий или анилиновый синий можно использовать в качестве менее токсичные заменители хлоразола черного Е или трипанового синего. Однако недостаточно доказательств, чтобы подтвердить, что эти другие красители нетоксичны — со всеми красителями следует обращаться внимательно. Можно использовать более низкую концентрацию КОН (2,5%). для снижения риска травм (Koske & Gemma 1989), но может быть неэффективным с корнями, которые трудно очистить.
6. Хранение проб и подготовка предметных стекол
  1. Окрашенные CBE корни становятся чище после обесцвечивания корней в 50% глицерин на несколько дней.
  2. Корни, окрашенные CBE, можно хранить в 50% глицерине, но другие красители не являются постоянными, если образцы не хранят в лактоглицерине или хранят в окрашивающем растворе.
  3. Полупостоянные предметные стекла окрашенных корней можно сделать с помощью Среда на основе поливинилового спирта (PVLG) (Koske & Tessier 1983) или на основе гуммиарабика. монтажные носители (Cunningham 1972).
  4. Интерференционно-контрастная микроскопия существенно улучшает контрастность мелких деталей грибковых структур (Brundrett et al., 1984).

D. Количественная оценка микоризных корней

Подробные инструкции по обработке образцов корней для обнаружения и количественного определения микориз опубликованы в руководствах, с которыми следует ознакомиться для получения дополнительной информации (Brundrett et al. 1994, 1996). Краткое изложение этих методов изложено ниже (после главы 4.3 в Brundrett et al. 1996).

Исследования микоризы часто требуют оценки доли корней в образце, содержащих микоризные структуры. После их очистки и окрашивания длину корней можно измерить одновременно с микоризной колонизацией с помощью процедуры пересечения линий сетки (Giovannetti & Mosse, 1980) или отдельно, рассматривая предметные стекла с помощью составного микроскопа (McGonigle et al., 1990).

Длина микоризных корней, присутствующих в образце, должна быть представлена ​​вместе с данными о доле (%) длины корней, занимаемой этими грибами, поскольку длина микоризных корней более прямо коррелирует с затратами/выгодами ассоциации и производством инокулята грибком.Данные о длине корней можно использовать для расчета скорости образования (роста) корней, плотности корней (в пределах объема почвы) и удельной длины корней (отношение длины корня к весу), которые предоставляют ценную информацию о способности корней получать воду или питательные вещества. из почв и их способность образовывать микоризные ассоциации.

Анализ данных о колонизации
Данные о микоризной колонизации корней и распространении грибковых пропагул, таких как споры, часто сильно варьируют и/или имеют ненормальное частотное распределение (St.Джон и Хант, 1983; Фризе и Коске, 1991). Таким образом, статистический анализ таких данных обычно требует преобразования данных или использования непараметрической статистики.
Оборудование
  • Прозрачные пластиковые чашки с вписанными линиями сетки для измерения колонизации
  • Тонкое сито (100 мкм) с нейлоновой сеткой для переноса корней из растворов
  • Тонкие щипцы и зонды для манипуляций с корнями
  • Предметные стекла для микроскопа, длинные покровные стекла и среда PVLG (Koske & Tessier 1983)
  • Пластиковые флаконы с плотно закрывающимися крышками для хранения образцов
  • Микроскоп для препарирования с подсветкой в ​​проходящем свете – рекомендуется прозрачная пластиковая панель над основанием микроскопа для обеспечения стабильной платформы и защиты от пролитых жидкостей
  • Составной микроскоп с перекрестием окуляра

1.Корни с арбускулярной микоризой

  1. Наиболее часто используемая процедура измерения корней представляет собой модификацию метода пересечения линий сетки (Newman 1966, Tennant 1975, Giovannetti & Mosse 1980), при котором корни случайным образом распределяются в чашке Петри диаметром 9 см с линиями сетки, как показано на рисунке. ниже. Наблюдатель сканирует эти линии сетки с помощью препаровального микроскопа, чтобы количественно определить пересечения между линиями сетки и корнями, которые обозначаются либо как колонизированные, либо как немикоризные.
  2. Соотношение длины корня с микоризой и общей длины корня можно затем рассчитать с помощью коэффициента преобразования, полученного из общей длины линий сетки и площади чашки (Newman 1966, Tennant 1975). Если используется сетка размером 11/14 см (примерно 1/2 дюйма), количество пересечений будет обеспечивать значения длины микоризных и немикоризных корней в см (см. пример в таблице ниже).
  3. Giovannetti & Mosse (1980) рекомендуют, чтобы для оценки выборки использовалось как минимум 100 пересечений, и обнаружили, что точность повышается, если выборки повторно рандомизируются и подсчитываются несколько раз.
  4. Более простая процедура, когда наблюдатель просто визуально оценивает степень микоризной колонизации (в пределах 5 или 10 %), также может быть надежной (Giovannetti & Mosse 1980). Хотя этот метод является субъективным и подвержен предвзятости оператора, он все же может предоставить достаточную информацию, когда точные значения не требуются (для контроля качества горшечных культур или при просмотре образцов из поля).

Пример пересечения линий сетки с использованием числа 8.Круглая чашка Петри диаметром 5 см с сеткой 1/2 дюйма (14/11 см) и тестовый образец нити длиной 1 м, разрезанный на фрагменты и случайно перераспределенный 10 раз (рис. 4.3 в Brundrett et al. 1996). Итоговые значения по строкам и столбцам приведены в таблице ниже.

Перераспределение 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Пересечения (см) 102 107 91 98 92 114 108 99 104 94
Среднее 100.9 см ± 2,5 (стандартная ошибка)
  1. Когда микоризную колонизацию оценивают с помощью препаровального микроскопа, всегда полезно сделать слайды из подвыборки корней для наблюдения с помощью составного микроскопа. Это позволит увидеть грибы, которые плохо окрашиваются (например, многие виды Acaulospora и некоторые виды Glomus ), и определить вклад сапробных или паразитических грибов. Можно также оценить вклад различных морфотипов микоризных грибов.
  2. Для измерения длины арбускул, везикул и внутренних гиф внутри корней можно использовать составной микроскоп с перекрестием окуляра, перемещаемым в произвольно выбранные положения (McGonigle et al. 1990), как показано ниже.

Микроскопическое исследование корней для количественного определения арбускулярной микоризы (рис. 4.4B в Brundrett et al. 1996).

2. Количественная оценка эктомикоризных ассоциаций

  1. Для количественного определения корней ВКМ использовались различные методы.Неокрашенные корни ВКМ обычно можно отличить от корней без микоризы по цвету, толщине, текстуре и характеру ветвления. Тем не менее, необходима процедура очистки и окрашивания или срезов (см. выше), чтобы визуализировать сеть Хартига, чтобы подтвердить наличие эктомикоризной ассоциации. Этап отбеливания после очистки для удаления избытка дубильных веществ часто помогает выявить сеть Хартига в корнях ECM.
  2. Корни внеклеточного матрикса обычно подсчитывают путем отбора проб сеянцев или промывания корней из керна почвы, стараясь исключить загрязняющие корни нецелевых видов.Если предположить, что корни молодые и здоровые, то каждый кончик микоризного корня будет содержать активную зону сети Хартига (где, как предполагается, происходят активные обменные процессы). Эти кончики можно подсчитать для количественной оценки интенсивности ассоциации, и их количество должно быть выражено относительно длины корня и объема почвы.
  3. Длина корня образца может быть измерена с помощью метода пересечения линий сетки при одновременном измерении длины микоризных корней или отдельном подсчете общего количества микоризных кончиков (см. ниже).
  4. Эктомикоризную ассоциацию может быть трудно распознать в сохраненных корнях, если есть минимальные изменения в ветвлении и толщине корня-хозяина.

Использование метода пересечения линий сетки для количественной оценки эктомикоризных корней (рис. 4.5A в Brundrett et al. 1996).

E. Обозначение микоризных и немикоризных корней

Для обозначения растений с микоризными ассоциациями использовались разные критерии, что иногда приводило к путанице в литературе по микоризе (Harley & Smith 1983, Brundrett 1991).Полное определение микориз представлено в Разделе 1, но определения немикоризных (НМ) корней и различных категорий микориз также необходимы для последовательной идентификации микориз. Следовательно, правильная идентификация микориз требует доказательств, основанных на всех этих определениях. Определение, используемое для распознавания ассоциаций VAM и ECM, обсуждается ниже с использованием протоколов от Brundrett et al. 1996 г. (раздел 1.6 стр. 32-37).

1. Ассоциации арбускулярной микоризы (ВАМ)

Наличие арбускул в корне используется для обозначения растений с ВАМ.Однако эти структуры эфемерны и могут отсутствовать в собранных в полевых условиях корнях. Следовательно, колонизация только гифами часто используется для идентификации ассоциаций VAM, но гифы и везикулы грибов VAM также могут занимать корни, не являющиеся хозяином (см. ниже). Спирали гиф или продольные гифы, но не арбускулы, можно увидеть в корнях, собранных в поле, по следующим причинам.

  1. Корни многих видов сохраняются в почве в течение месяцев или лет без вторичного роста, но арбускулы представляют собой эфемерные структуры, которые существуют всего несколько недель (Brundrett & Kendrick 1990).Однако всегда можно найти арбускулы, если образцы содержат молодые корни (с отрастающими кончиками).
  2. Корни с полей часто сильно пигментированы фенолами и другими вторичными метаболитами и могут потребовать стадии отбеливания после очистки.
  3. Арбускулы могут быть труднее увидеть у растений с извилистым VAM или в случаях, когда они встречаются в одном слое коры (Brundrett & Kendrick 1990).
  4. В экосистемных исследованиях сапрофитная колонизация нехозяинных корней, корневищных чешуй и т. д.гифами и пузырьками грибов Glomeromycotan встречается относительно часто, как показано в приведенном ниже тематическом исследовании.
  5. Эксплуатационные ассоциации МВА микогетеротрофных растений лишены арбускул.

Следовательно, для определения наличия VAM в более старых корнях может потребоваться предварительное знание этого вида растений. Эти знания включают информацию о фенологии корней и предыдущие наблюдения за одним и тем же или близкородственными видами. Больше информации приведет к более безопасным выводам.

2.Эктомикоризные (ECM) ассоциации

Наличие сети Хартига, состоящей из лабиринтных гиф между клетками эпидермиса или коры корня, обычно используется для идентификации корней ВКМ (Harley & Smith 1983). Эксперименты с микоризой показали, что образование сети Хартига является хорошим индикатором совместимости хозяина и гриба и коррелирует с реакцией хозяина на рост (Тонкин и др., 1989, Берджесс и др., 1994, Делл и др., 1994). Морфологические определения используются для выявления микоризных ассоциаций.Эктендомикоризы, арбутоидные и монотропоидные ассоциации считаются типами ассоциаций ВКМ (раздел 1). Некоторые растения имеют как ECM, так и VAM, как объяснено в разделе о двойных ассоциациях.

Наблюдения за плодоношением предполагаемых ECM-грибов вблизи потенциального растения-хозяина не дают достаточных доказательств для подтверждения наличия связи (Harley & Smith 1983). Проблемы возникают, если грибы плодоносят на значительном расстоянии от своего дерева-хозяина или ошибочно предполагают, что они образуют ассоциации ECM.Один такой пример, описанный ниже, включает грибок Gyrodon (Boletinellus) merulioides , который в течение многих лет считался ассоциированным с внеклеточным матриксом ясеня ( Fraxinus americana ) – деревом, имеющим только VAM. В настоящее время известно, что этот гриб образует ассоциацию с тлей, которая паразитирует на корнях Fraxinus (Brundrett & Kendrick 1987).

3. Факультативные ассоциации и немикоризные растения

Подробные исследования растений в природных экосистемах часто показывают устойчивые различия между растениями-хозяевами как в интенсивности, так и в стабильности образования микоризы (доля вовлеченной корневой системы).Эти наблюдения показали, что виды обычно либо имеют постоянно высокий уровень микоризы, низкий или переменный уровень микоризы, либо не являются микоризными (Janos 1980, Brundrett & Kendrick 1988). Растения, принадлежащие к этим категориям, обозначаются как обязательно микоризные, факультативно микоризные или немикоризные, как описано в разделе 7. Растения с факультативной микоризой постоянно имеют низкий уровень колонизации (т.е. менее 25 % длины корня) (Janos 1980, Brundrett & Kendrick 1988). .Характеристики корневых систем растений, особенно длина и обилие корневых волосков, обычно коррелируют со степенью микоризного образования, как показано в таблице ниже.

Типичные признаки корневых систем хозяина и микоризного образования, связанные с категориями микоризного образования.
Обозначение: Обязательный Факультативный Немикоризный
Колонизация:      
Арбускулы молодые корни разреженный или переменный нет
гифы или везикулы старые корни разреженный или переменный может встречаться в старых корнях
Корни:      
диаметр часто грубый обычно хорошо обычно тонкие
корневые волоски несколько/короткие много/длинный много/длинный

4.Эндофитные ассоциации

Эндофитные грибы с бессимптомными ассоциациями часто встречаются в корнях растений (Addy et al. 2005. Schultz & Boyle 2005, Schultz et al. 2006). Эндофитный рост микоризных грибов встречается довольно часто и отличается в первую очередь от микоризных ассоциаций, образованных теми же грибами в других местах, отсутствием арбускул или скоординированным развитием молодых корней (Brundrett 2004, 2006). Сапрофитная деятельность также отличается от микоризных ассоциаций, поскольку вовлеченные корни обычно стареют, часто также содержат сапрофитные грибы.Считается, что эндофитная колонизация НМ растений имеет ограниченное функциональное значение, поскольку не приводит к реакции роста растений (Ocampo 1986, Muthukumar et al. 1997, Giovannetti & Sbrana 1998).

Гломеромикотановые грибы — это вездесущие почвенные организмы, которые могут колонизировать различные субстраты, включая корневищные чешуи и стареющие корни видов NM и ECM (St. John et al. 1983, Harley & Harley 1987, Brundrett & Kendrick 1988, Cázares & Trappe 1993, Смит и др.1998, Имхоф, 2001). Эндофитная активность отличается от функциональных двойных ассоциаций ECM/VAM отсутствием арбускул. Возможно, что некоторые сообщения о МВА у растений преимущественно НМ-семейств являются следствием сапрофитной активности, если арбускулы не использовались для определения МВА. Менее вероятно, что эти сообщения являются результатом неправильной идентификации гриба, поскольку гифы и пузырьки имеют характерный вид.

Несимбиотические грибы также часто растут на поверхности корней, и иногда это напоминает ассоциации внеклеточного матрикса, но у этих корней отсутствует сеть Хартига и морфологические реакции (набухание и ветвление коротких корней), характерные для истинного внеклеточного матрикса.Примеры роста грибов на корнях Acer и Scaevola показаны ниже и обсуждаются в разделе 8. Грибы, колонизирующие поверхность корней, могут быть полезными, вредными или нейтральными для растений.

Примеры эндофитного роста микоризных грибов и других грибов проиллюстрированы в тематических исследованиях, представленных ниже.

5. Рекомендации

Наличие арбускул следует использовать для идентификации VAM, а наличие сети Хартига — для определения ассоциаций ECM.Однако эти определения не всегда применяются, и может потребоваться осторожное суждение при интерпретации микоризных ассоциаций в корнях, собранных в поле, особенно если корни старые или ассоциации нетипичны.

Существуют разногласия относительно того, что является наиболее подходящим названием для этих ассоциаций — арбускулярная микориза или везикулярно-арбускулярная микориза (см. Brundrett 2004). Название арбускулярная микориза постепенно стало более распространенным в научной литературе, чем везикулярно-арбускулярная микориза.Рекомендуется использовать как слова arbuscule, так и Glomeromycotan в заголовке или ключевых словах статей, чтобы гарантировать, что они будут найдены компьютеризированными поисковыми программами в будущем.

Термины эктомикориза / эктомикориза / эктомикориза должны использоваться для ассоциации ECM.

Степень микоризного образования растения-хозяина обычно выражается как доля (%) длины корня, заселенного микоризными грибами. Однако следует исключить корни с перидермальным (коровым) слоем, возникшим в результате вторичного роста, поскольку они не имеют коры.В исследованиях экосистем лучше всего выражать степень микоризной колонизации как долю корней, доступных для колонизации, которые были микоризными. Это требует понимания динамики роста корней и образования микоризы.

F. Тематические исследования

Гифы (стрелки) и везикулы (V) гриба Glomeromycotan в корневище Hydrophyllum virginianum , немикоризного растения. Это сапрофитная активность без арбускул (Brundrett & Kendrick 1988).


От Brundrett & Kendrick 1988

Рост гиф на поверхности корней иногда ошибочно принимают за внеклеточный матрикс. Этот неизвестный гриб растет на корнях Acer saccharum (сахарного клена), растения-хозяина VAM из Канады.


От Brundrett & Kendrick 1988

Неизвестный грибок, растущий на корнях Scaevola calliptera (Веерный цветок), растения-хозяина VAM из Западной Австралии.Сообщалось, что члены этого семейства (Goodeniaceae) имеют ECM-подобные ассоциации без сети Хартига (Warcup 1980).


См. Brundrett & Abbott 1991

Необычные ассоциации могут возникать в саженцах деревьев, выращенных в питомниках, при отсутствии более типичных грибов ECM. В данном случае конидиальный гриб сформировал «поверхностный» ВКМ в питомнике, выращенном на сеянцев эвкалипта с тонкой оболочкой.


От Brundrett 2006

Подберезовик (Gyrodon merulioides) особенно плодоносит под ясенями (Fraxinus americana) в Северной Америке, поэтому был внесен в список грибов ECM, хотя у ясеней есть только VAM.Однако G. merulioides на самом деле имеет мутуалистическую ассоциацию с корневой тлей, которую он защищает внутри полых черных склероций (Brundrett & Kendrick 1988).

От Брандретта и Кендрика, 1988 г.
На слайде показаны склероции с тлей на корне ясеня в поперечном сечении

Версия 2.0 © Mark Brundrett 2008

Метод экспресс-окрашивания для оценки эктомикоризной инфекции корней дуба

Если у вас установлено соответствующее программное обеспечение, вы можете загрузить данные о цитировании статей в менеджер цитирования по вашему выбору.Просто выберите программное обеспечение менеджера из списка ниже и нажмите «Загрузить».

Цитируется по

1. Являются ли арбускулярно-микоризные проростки Alnus incana более устойчивыми к засухе, чем эктомикоризные и немикоризные?

2. Морозостойкость микоризных (Hebeloma sp. или Suillus luteus) и немикоризных сеянцев сосны обыкновенной микоризные проростки Alnus incana

4. Влияют ли эктомикоризы на поглощение бора Betula pendula?

5. Борьба с корневой гнилью сосны голубой (Pinus wallichiana), вызываемой Rhizoctonia solani и Fusarium oxysporum, с помощью грибковых антагонистов Показатели насекомых-травоядных

7. Подземные реакции березы повислой на воздействие повышенных уровней CO2 и O3 в течение трех вегетационных сезонов

8. Применение эктомикоризных грибов при укоренении фасцикулярных побегов сосны обыкновенной

9. Влияние повышенного содержания озона и ограниченной доступности азота на сеянцы хвойных в системе фумигации на открытом воздухе: влияние на рост, содержание питательных веществ, микоризу, ультраструктуру хвои, крахмал и вторичные соединения

10. Роль воздействия низкого уровня озона и микоризы на химическое качество и активность насекомых-травоядных на сеянцах сосны обыкновенной

11. Влияние повышенного содержания CO 2 и О 3 на тонкие корни и микоризу естественно растущих молодых деревьев сосны обыкновенной в течение трех лет экспозиции и на рост сосновой тли серой

14. Повреждения микоризы сосны обыкновенной и химические градиенты в лесной почве в среде целлюлозного завода в центральной Финляндии

15. Алюминий вызывает дисбаланс питательных веществ и структурные изменения в хвое сосны обыкновенной, не вызывая явных повреждений корней

16 Взаимодействия между воздействием O3 и питательным статусом деревьев: влияние на содержание и поглощение питательных веществ, рост, микоризу и ультраструктуру хвои

Микроволновая технология очистки и окрашивания арбускулярных микоризных грибов в корнях

  • Bajwa R, Mahmood S, Naz JZ, Nasim G (1996)Быстрый метод очистки и окрашивания корней микоризы VA.Sci Khyber (Пакистан) 9:35–41

    Google Scholar

  • Bakkeren G, Kronstad JW, Lévesque CA (2000) Сравнение отпечатков пальцев AFLP и последовательностей ITS в качестве филогенетических маркеров Ustilaginomycetes. Микология 92:510–521

    Статья КАС Google Scholar

  • Bevege DI (1968) Быстрый метод очистки от дубильных веществ и окрашивания целых корней для обнаружения микоризы, вызванной Endogone spp., а также некоторые записи об инфекции на австралийских растениях. Trans Br Mycol Soc 51:808–810

    Артикул Google Scholar

  • Brundrett MC, Piché Y, Peterson RL (1984) Новый метод наблюдения за морфологией везикулярно-арбускулярной микоризы. Can J Bot 62:2128–2134

    Статья Google Scholar

  • Ferriss RS (1984) Влияние обработки микроволновой печью на микроорганизмы в почве.Фитопатология 74:121–126

    Статья Google Scholar

  • Ганж А.С., Бауэр Э., Стэгг П.Г., Аплин Д.М., Гиллам А.Е., Бракен М. (1999) Сравнение методов визуализации для регистрации арбускулярной микоризной колонизации. Новый Фитол 142:123–132

    Статья Google Scholar

  • Grace C, Stribley DP (1991) Более безопасная процедура для рутинного окрашивания везикулярно-арбускулярных микоризных грибов.Mycol Res 95:1160–1162

    Артикул Google Scholar

  • Hafajee ZAM, Leong ASY (2004) Сверхбыстрая обработка тканей, стимулированная микроволнами, с модифицированным протоколом, включающим фиксацию микроволнами. Патология 36:325–329

    PubMed Статья Google Scholar

  • Hamel C, Fyles H, Smith DL (1990) Измерение развития эндомикоризного мицелия с использованием трех различных витальных красителей.Новый фитол 115:297–302

    Статья Google Scholar

  • Ishii S, Loynachan TE (2004) Быстрые и надежные методы выделения ДНК из корней микоризы, окрашенных трипановым синим: сравнение двух методов. Микориза 14:271–275

    PubMed Статья КАС Google Scholar

  • Кок Л.П., Бун М.Е. (1992) Поваренная книга для микроскопистов в микроволновой печи: искусство и наука визуализации.Coulomb Press Лейден, Нидерланды

    Google Scholar

  • Корманик П.П., МакГроу А.С. (1982) Количественная оценка везикулярно-арбускулярной микоризы в корнях растений. В: Schenck NC (ed) Методы и принципы исследования микоризы. Американское фитопатологическое общество, Сент-Пол, стр. 37–45

    . Google Scholar

  • Koske RE, Gemma JN (1989) Модифицированная процедура окрашивания корней для выявления микоризы VA.Mycol Res 92:486–488

    Артикул Google Scholar

  • Линфорд М.Б. (1942) Методы наблюдения почвенной флоры и фауны, связанные с корнями. Почвоведение 53:93–103

    Статья Google Scholar

  • Mizuhira V, Hasegawa H (1996) Метод микроволновой фиксации для цитохимии. Eur J Morphol 34: 385–391

    PubMed Статья КАС Google Scholar

  • Омар М.Б., Болланд Л., Хезер В.А. (1979) Постоянная посадочная среда для грибков.Bull Brit Mycol Soc 13:31–32

    Статья Google Scholar

  • Phillips JM, Hayman DS (1970) Усовершенствованные процедуры очистки корней и окрашивания паразитарных и везикулярно-арбускулярных микоризных грибов для быстрой оценки инфекции. Trans Br Mycol Soc 55:158–161

    Статья Google Scholar

  • Pitet M, Camprubí A, Calvet C, Estaún V (2009) Модифицированный метод окрашивания арбускулярной микоризы, совместимый с молекулярными зондами.Микориза 19:125–131

    PubMed Статья КАС Google Scholar

  • Robideau GP, De Cock AWAM, Coffey MD et al (2011) ДНК-штрихкодирование оомицетов с помощью субъединицы I оксидазы цитохрома c и внутреннего транскрибируемого спейсера. Мол Экол Ресурс 11:1002–1011

    PubMed Статья КАС Google Scholar

  • Schaffer GF, Peterson RL (1993) Модификации методов очистки, используемых в сочетании с прижизненным окрашиванием корней, колонизированных везикулярно-арбускулярными микоризными грибами.Микориза 4:29–35

    Статья Google Scholar

  • Schichnes D, Nemson J, Sohlberg L, Ruzin SE (1998) Микроволновые протоколы для парафиновой микротехники и локализации in situ в растениях. Microsc Microanal 4:491–496

    PubMed Статья КАС Google Scholar

  • Шиптон В.А., Браун Дж.Ф. (1962) Техника очистки и окрашивания всего листа для демонстрации взаимоотношений между хозяином и патогеном стеблевой ржавчины пшеницы.Фитопатология 52:1313

    Google Scholar

  • Sokolski S, Dalpé Y, Séguin S, Khasa D, Lévesque CA, Piché Y (2010) Конспецифичность DAOM 197198, модельного арбускулярного микоризного гриба, с Glomus Islamice : молекулярные доказательства с тремя генами, кодирующими белок. Ботаника 88:829–838

    Статья КАС Google Scholar

  • Tarkalson DD, Pendleton RL, Jolley VD, Robbins CW, Terry RE (1998) Подготовка и окрашивание микоризных структур в сухих бобах, сладкой кукурузе и пшенице с использованием блочного варочного котла.Коммунальный почвоведческий завод 29:2263–2268

    Статья КАС Google Scholar

  • van Tuinen D, Jacquot E, Zhao B, Gollotte A, Gianinazzi-Pearson V (1998) Характеристика профилей колонизации корней микрокосмическим сообществом арбускулярных микоризных грибов с использованием гнездовой ПЦР, нацеленной на 25S рДНК.

  • Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *